基因突变与原核生物的质粒.pptVIP

原核生物的质粒;③可以通过转化、转导或接合作用而由一个细菌细胞转移到另一个菌细胞中，使两个细胞都成为带有质粒的细胞；质粒转移时，它可以单独转移，也可以携带着染色体（片段）一起进行转移，所以它可成为基因工程的载体。

④对于细菌的生存并不是必要的

⑤功能多样化;功能：进行细胞间接合，并带有一些基因，如产生毒素、抗药性、固氮、产生酶类、降解功能等。

重组：在质粒之间、质粒与染色体之间菌可发生。

存在范围：很多细菌如E.coli、Shigella（志贺氏菌）、S.aureus（金黄色葡萄球菌）、Streptococcuslactis（乳链球菌）、根癌土壤杆菌等

制备：包括增殖、裂解细胞、分离质粒与染色体和蛋白质等成分、去除RNA和蛋白质等步骤。

鉴定：电镜观察、电泳、密度梯度离心、限制性酶切图谱等方法;几种代表性质粒：;Figure.RepresentativeFERTILITYPLASMID.Afertilityplasmidcarriesthegenesforconjugationaswellasanumberofothergenes.Inthisfigurethefertilityplasmidalsocarriesantibioticresistantgenes.

;最初发现于痢疾志贺氏菌（Shigelladysenteriae），后来发现还存在于Salmonella（沙门氏菌）、Vibrio（副溶血性弧菌）、Bacillus（芽孢杆菌）、Pseudomonas（假单胞菌）和Staphylococcus（葡萄球菌）中。

R因子由相连的两个DNA片段组成，即抗性转移因子（resistencetransforfactor，RTF）和抗性决定R因子（r-determinant），RTF为分子量约为11×106Dalton，控制质粒copy数及复制，抗性决定质粒大小不固定，从几百万到100×106Dalton以上。其上带有其它抗生素的抗性基因。

R-因子在细胞内的copy数可从1~2个到几十个，分为严紧型和松弛型两种，经氯霉素处理后，松弛型质粒可达2000~3000个/细胞。

;产大肠杆菌素因子。

大肠杆菌素是由E.coli的某些菌株所分泌的细菌素，能通过抑制复制、转录、转译或能量代谢等而专一地杀死其它肠道细菌。其分子量约4×104~8×104Dalton。大肠杆菌素都是由Col因子编码的。

Col因子可分为两类，分别以ColE1和ColIb为代表。

ColE1分子量约为5×106Dalton，无接合作用，是多copy的；ColE1研究得很多，并被广泛地用于重组DNA的研究和用于体外复制系统上。

ColIb分子量约为80×106Dalton，它与F因子相似，具有通过接合作用转移的功能，属于严紧型控制，只有1~2个copy。

凡带Col因子的菌株，由于质粒本身编码一种免疫蛋白，从而对大肠杆菌素有免疫作用，不受其伤害。;降解性质粒

只在假单胞菌属中发现。它们的降解性质粒可为一系列能降解复杂物质的酶编码，从而能利用一般细菌所难以分解的物质做碳源。这些质粒以其所分解的底物命名，例如有分解CAM（樟脑）质粒，XYL（二甲苯）质粒，SAL（水杨酸）质粒，MDL（扁桃酸）质粒，，NAP（萘）质粒和TOL（甲苯）质粒等。

;基因：能够表达和产生基因产物（蛋白质或RNA）的DNA序列。;遗传密码：指DNA链上各个核苷酸的特定排列顺序;核外DNA的种类;第二节基因突变和诱变育种;★依表型的改变分为：

形态突变型——

营养缺陷型——因突变而丧失产生某种生物合成酶的能力，并因而成为必须在培养基中添加某种物质才能生长的突变类型。

发酵突变型——丧失产生某种生物合成酶能力的突变型

抗性突变型——因突变而产生了对某种化学药物或致死物理因子的抗性

条件致死突变型——突变后在某种条件下可正常生长繁殖，而在另一条件下却无法生长繁殖的突变型

抗原突变型——因突变而引起的抗原结构发生改变

产量突变型——

;★按是否比较容易、迅速地分离到发生突变的细胞来分：

选择性突变株（selectivemutant）：具有选择标记（如营养缺陷性、抗性突变型、条件致死突变型），只要选择适当的环境条件，如培养基、温度、pH值等，就比较容易检出和分离到。

非选择性突变株（non-selectivemutant）：无选择标记（如产量突变型、抗原突变型、形态突变型），能鉴别这种突变体的惟一方法是检查大量菌落并找出差异。

;;定义：每一细胞在每一世代中发生某一性状突变的几率。

突变率为10–8是指该细胞在一亿次细胞分裂中，会发生一次突变。突变率也可以用每一单位群体在每一世代中产生突变株（mutant，即突