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中国医科大学20秋学期《生理学》实践考试试题
考试须知
各位同学,欢迎参加本次《生理学》实践课程期末考试。本次考试旨在考察大家对生理学基本实验原理、操作技能、结果观察与分析以及实验报告撰写能力的掌握程度。请在考试过程中严格遵守实验室规章制度,仔细阅读题目要求,规范操作,确保实验安全有序进行,并独立完成实验报告。考试时间为[具体时长,此处省略数字]分钟,请合理安排时间。
实验项目一:神经肌肉标本的制备与兴奋性观察
一、实验目的
1.掌握蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2.观察不同刺激强度和刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。
3.理解阈刺激、阈上刺激、最大刺激的概念,以及单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩的产生机制。
二、实验材料
蟾蜍、手术器械(粗剪刀、组织剪、眼科剪、手术刀、镊子、探针、玻璃分针、蛙钉、锌铜弓)、张力换能器、生物信号采集处理系统、培养皿、任氏液、棉线等。
三、实验内容与步骤
1.蟾蜍毁脑脊髓法:左手持蟾蜍,右手持探针从枕骨大孔处垂直刺入,向前搅动破坏脑,向后搅动破坏脊髓,确保蟾蜍四肢松软无反射。
2.剥制后肢:用粗剪刀自鼓膜后缘剪去头部及前肢,沿脊柱两侧剪去肋骨,然后自耻骨联合处剪断,分离两后肢。剔除一侧后肢的皮肤,注意避免损伤坐骨神经。
3.分离坐骨神经:暴露坐骨神经,用玻璃分针仔细分离,从脊柱根部至腘窝处,穿线结扎。
4.制备腓肠肌标本:在膝关节下方剪断股骨,在跟腱处穿线结扎,剪断跟腱与足部的联系。游离腓肠肌至膝关节处,注意保留支配腓肠肌的神经分支。
5.标本安置与连接:将标本置于盛有任氏液的培养皿中。将股骨残端固定于肌槽的蛙钉上,跟腱的结扎线连接至张力换能器,坐骨神经搭在刺激电极上。
6.实验观察:
*刺激强度对骨骼肌收缩的影响:从零开始逐渐增加刺激强度,观察并记录肌肉开始出现收缩时的最小刺激强度(阈刺激),继续增加强度,直到肌肉收缩幅度不再增加(最大刺激)。
*刺激频率对骨骼肌收缩的影响:采用最大刺激强度,逐渐增加刺激频率,观察并记录肌肉出现单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩时的刺激频率范围及收缩曲线特征。
7.锌铜弓刺激神经:用湿润的锌铜弓轻触坐骨神经,观察肌肉是否收缩,以验证标本的兴奋性。
四、结果与讨论
1.记录所制备标本的阈刺激强度、最大刺激强度数值。
2.描绘不同刺激强度下骨骼肌收缩幅度的变化曲线,并解释其原因。
3.描绘不同刺激频率下骨骼肌收缩形式的曲线(单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩),并阐述其产生的生理机制。
4.分析锌铜弓刺激神经引起肌肉收缩的原理。
5.实验过程中遇到了哪些问题?如何解决的?标本制备成功的关键步骤是什么?
五、注意事项
1.操作过程中避免损伤神经和肌肉组织,动作轻柔。
2.经常用任氏液湿润标本,防止干燥失活。
3.分离神经时必须使用玻璃分针,避免金属器械直接触碰神经。
4.刺激电极应置于神经干上,且与肌肉保持一定距离,避免直接刺激肌肉。
实验项目二:影响血液凝固的因素
一、实验目的
1.观察几种常见因素(如温度、接触面光滑度、某些化学物质等)对血液凝固时间的影响。
2.理解血液凝固的基本过程及其实验室检测方法。
二、实验材料
家兔(或其他动物抗凝全血)、试管、试管架、恒温水浴箱、冰块、秒表、竹签、不同接触面的容器(玻璃管、涂硅油玻璃管)、生理盐水、肝素溶液、枸橼酸钠溶液、氯化钙溶液等。
三、实验内容与步骤
1.取血:由家兔耳缘静脉取血(或领取已制备好的抗凝全血,注意需提前处理以去除抗凝剂影响或使用新鲜非抗凝血),分别注入标记好的不同试管中,每管血量尽量一致。
2.观察以下因素对凝血时间的影响:
*对照管:洁净玻璃试管,室温放置。
*温度影响:一支试管置于37℃恒温水浴中,另一支置于冰浴中。
*接触面光滑度影响:一支为涂有硅油的玻璃试管,室温放置。
*物理因素:一支玻璃试管,用竹签不断搅动。
*化学物质影响:预先在试管中加入少量肝素溶液或枸橼酸钠溶液,再加入血液(另设仅加生理盐水的对照)。
3.凝血时间判断:自血液进入试管后开始计时,每隔一段时间将试管轻轻倾斜或用竹签挑起,观察是否有血凝块形成,至血液不再流动或竹签上出现纤维蛋白丝为止,记录所需时间。
四、结果与讨论
1.将各实验管的凝血时间填入自行设计的表格中。
2.分析不同温度(高温、低温)对血液凝固过程的影响及其机制。
3.比较不同接触面光滑度条件下凝血时间的差异,并解释原因。
4.说明竹签搅动为何能加速血液凝固(或观察到什么现象)。
5.肝素和枸橼酸钠的抗凝机制有何不同?它们的抗凝效果是否可逆?
五、注意事项
1.
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