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细胞培养工艺工程师岗位招聘考试试卷及答案
一、填空题（每题1分，共10分）
1.哺乳动物细胞培养常用基础培养基包括DMEM、______、RPMI1640等。
2.细胞冻存最常用保护剂是______（二甲基亚砜）。
3.生物反应器通气方式含表面通气、______通气。
4.细胞培养无菌操作核心是避免______污染。
5.哺乳动物细胞最适生长温度为______℃（±0.5℃）。
6.支原体检测常用分子方法是______。
7.培养基灭菌过滤孔径为______μm。
8.细胞生长曲线含延迟期、对数期、______期、衰亡期。
9.悬浮培养搅拌方式有桨式、______搅拌。
10.细胞培养常用pH缓冲体系是______-HCO??体系。
二、单项选择题（每题2分，共20分）
1.哺乳动物细胞培养基pH范围通常为（）
A.6.0-6.5B.6.8-7.2C.7.2-7.4D.7.5-8.0
2.血清灭活温度时间为（）
A.37℃30minB.56℃30minC.60℃15minD.4℃过夜
3.大规模悬浮细胞培养适合的反应器是（）
A.搅拌式B.中空纤维C.平板D.转瓶
4.贴壁细胞消化常用酶是（）
A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.胶原酶D.木瓜蛋白酶
5.支原体污染细胞最明显变化是（）
A.细胞裂解B.培养液浑浊C.细胞形态异常D.出现菌丝
6.灌流培养主要优势是（）
A.操作简单B.周期短C.产物浓度高D.成本低
7.细胞冻存正确降温速率是（）
A.快速B.1℃/minC.-1℃/minD.室温放置后冻存
8.无菌操作台紫外灭菌时间为（）
A.10minB.20-30minC.1hD.2h
9.悬浮细胞计数常用方法是（）
A.台盼蓝染色B.结晶紫C.免疫荧光D.流式细胞术
10.导致细胞污染的情况是（）
A.培养基过滤B.关闭操作台风机C.血清灭活D.细胞冻存
三、多项选择题（每题2分，共20分）
1.细胞培养基主要成分含（）
A.氨基酸B.维生素C.血清D.抗生素
2.细胞培养常见污染类型（）
A.细菌B.真菌C.支原体D.病毒
3.生物反应器类型含（）
A.搅拌式B.气升式C.中空纤维D.转瓶
4.无菌操作注意事项（）
A.洗手消毒B.物品近火焰C.避免说话咳嗽D.定期灭菌操作台
5.影响细胞生长因素（）
A.温度B.pHC.溶氧（DO）D.渗透压
6.灌流培养关键步骤（）
A.连续灌注培养基B.细胞截留C.连续收集产物D.定期换液
7.细胞冻存注意事项（）
A.冻存液比例7:2:1B.慢降温C.冻存管密封D.快速复苏
8.支原体检测方法（）
A.PCRB.培养法C.Hoechst染色D.电镜
9.培养基灭菌方法（）
A.0.22μm过滤B.湿热灭菌C.辐照D.干热
10.悬浮细胞分离方法（）
A.离心B.过滤C.自然沉降D.胰酶消化
四、判断题（每题2分，共20分）
1.哺乳动物细胞培养不需要CO?环境。（）
2.血清灭活目的是去除补体成分。（）
3.细胞培养DO控制100%空气饱和度最佳。（）
4.支原体污染不影响细胞生长功能。（）
5.悬浮细胞不需要贴附载体。（）
6.胰酶消化时间越长，细胞分散越好。（）
7.灌流培养比批式培养产量高。（）
8.无菌操作台使用后立即关风机。（）
9.冻存液DMSO浓度一般10%。（）
10.抗生素可完全避免细菌污染。（）
五、简答题（每题5分，共20分）
1.简述细胞培养无菌操作核心要点。
2.简述哺乳动物细胞冻存关键步骤及注意事项。
3.简述批式与灌流培养主要区别。
4.简述细胞培养常见污染及快速检测方法。
六、讨论题（每题5分，共10分）
1.细胞生长缓慢的可能原因及解决措施。
2.如何优化生物反应器细胞培养的DO控制策略？
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答案部分
一、填空题答案
1.MEM2.DMSO3.深层4.微生物5.376.PCR7.0.228.平台9.磁力10.HCO??（或HEPES）
二、单项选择题答案
1.C2.B3.A4.B5.C6.C7.B8.B9.A10.B
三、多项选择题答案
1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABCD6.ABC7.ABCD8.ABCD9.ABC10.ABC
四、判断题答案
1.×2.√3.×4.×5.√6.×7.√8.×9.√10.×
五、简答题答案
1.无菌操作核心要点：①操作前洗手消毒，穿无菌服、戴口罩手套；②操作台紫外灭菌20-30min，开启风机；③物品靠近酒精灯火焰操作，避免交叉污染；④不说话咳嗽，防飞沫污染；⑤培养基/试剂提前灭菌，使用前检查无菌；⑥操作后清理操作台，定期消毒。
2.冻存关键步骤及注意事项：①冻存液配制（培养基:血清:DMSO=7:2:1）；②收集对数期细胞，离心重悬（密度1×10?-1×10?/mL）；③分装冻存管，密封
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