CN110386860B 一种大麻二酚的高效提取方法 （李卫）.docxVIP

(19)国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN110386860B

(45)授权公告日2022.08.02

(21)申请号201910773152.8

(22)申请日2019.08.21

(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号CN110386860A

(43)申请公布日2019.10.29

(66)本国优先权数据

201910645811.X2019.07.17CN

(73)专利权人李卫

地址150001黑龙江省哈尔滨市道里区地

段街151号

(72)发明人孟庆刚李卫赵立涛孙宇峰付荣太杜继伟孟鑫岳琦

吕明明李宝林

(74)专利代理机构哈尔滨市伟晨专利代理事务所(普通合伙)23209

专利代理师刘坤

(51)Int.CI.

CO7C37/68(2006.01)

CO7C39/23(2006.01)

(56)对比文件

CN105567592A,2016.05.11

CN105884405A,2016.08.24

CN107337586A,2017.11.10

CN101880637A,2010.11.10

CN105567605A,2016.05.11

CN101249315A,2008.08.27

CN109232191A,2019.01.18

CN109776275A,2019.05.21

段振等.超高压技术及其在提取植物天然活性成分中的应用进展.《食品与发酵工业》

.2017,第43卷(第12期),245-252.

审查员王青华

权利要求书2页说明书9页附图1页

(54)发明名称

一种大麻二酚的高效提取方法

nY(57)摘要

nY

CN110386860B本发明涉及一种大麻二酚的高效提取方法，属于植物有效成分提取方法技术领域。为解决现有大麻二酚提取效率低、产品纯度低、收率低的问题，本发明提供了一种大麻二酚的高效提取方法，包括汉麻原料经哈茨木霉发酵→超高压处理→多粘芽孢杆菌发酵→洗涤离心→大孔吸附树脂除杂→硅胶层析柱纯化，最终得到纯度为98%的大麻二酚固体，且未检出四氢大麻酚杂质。本发明从汉麻中提取大麻二酚时，采用真菌固体发酵、超高压处理和芽孢杆菌固体发酵相结合的前处理方法，利用微生物发酵代谢产生的酶系能够破坏汉麻细胞中致密的物理化学结构，超高压处

CN110386860B

CN110386860B权利要求书1/2页

2

1.一种大麻二酚的高效提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、将汉麻叶和汉麻花80℃干燥10～12h后粉碎至40目得到汉麻粉；配制哈茨木霉液体发酵培养基，以料液比1g:1mL向所述哈茨木霉液体发酵培养基中加入所述汉麻粉，120℃灭菌锅中灭菌20min,冷却后待用；

步骤二、哈茨木霉活化后接入液体种子培养基，25℃温度下种子培养48h得到菌丝浓度为200～250g/L的哈茨木霉种子液；以接种量7mL将哈茨木霉种子液接入50mL步骤一所得冷却后的哈茨木霉液体发酵培养基，混匀后于28℃温度和92%相对湿度条件下固体培养5天得到哈茨木霉发酵培养物；将所得哈茨木霉发酵培养物置于120℃灭菌锅中灭菌40min,冷却、充分干燥并粉碎至40目待用；

步骤三、向步骤二所得粉碎后的哈茨木霉发酵培养物中加水制成混悬液，将所述混悬液装入耐压的塑料袋中，密封后放入超高压处理装置的提取容器中；常温下在15min时间内将超高压处理装置内的压强升高至500Mpa并保压20min,然后在10～14s内将超高压处理装置内的压强迅速泄为常压；重复升压泄压的操作3次后，将塑料袋从超高压处理装置的提取容器中取出待用；

步骤四、向步骤三所得超高压处理后的物料中添加牛肉膏、蛋白胨和NaCl配制营养肉汤培养基，120℃灭菌锅中灭菌20min,冷却后待用；

步骤五、多粘芽孢杆菌活化后接入多黏芽孢杆菌液体种子培养基，37℃温度、220r/min转速下培养24h得到芽孢率达到90%以上的多粘芽孢杆菌种子液；以3mL接种量将多粘芽孢杆菌种子液接入50mL步骤三所得冷却后的营养肉汤培养基，28℃温度、80%相对湿度条件下固体培养24h得到多粘芽孢杆菌发酵培养物，将所得多粘芽孢杆菌发酵培养物置于120℃灭菌锅中灭菌40min待用；

步骤六、将冷却后的步骤五所得灭过菌多粘芽孢杆菌发酵培养物用2～3倍体积的95%乙醇充分洗涤，离心