实验3-ELISA法测定乙肝.pptVIP

实验七ELISA法测定乙肝;酶标记免疫技术;酶联免疫吸附试验;掌握酶联免疫吸附试验的原理、方法和结果判断及临床应用。;将抗原（或抗体）结合于某种固相载体的表面，并保持免疫活性，再以标本中的待检抗体（或抗原）与之结合，然后使酶标抗体与已形成的抗原抗体复合物结合，分别洗去未结合的抗原与抗体，最后加入酶反应的底物，出现呈色反应，该反应中的有色产物含量与待检抗体（抗原）的含量直接相关。;ELISA测定方法有：

间接法：检测抗体最常用的方法；

双抗体夹心法：检测抗原最常用的方法；

竞争法：既可用于测抗原，又可用于测抗体；;（1）间接法测定抗体

A.将抗原吸附于固相载体表面(试剂盒生产厂家已经做好）；

B.加抗体,形成抗原-抗体复合物?;

C.??加酶标抗体（多为37℃孵育）；

D.洗液洗去多余?未结合酶标抗体

E.加底物,显色反应，测定底物的降解量和抗体量有关。

;（2）双抗体夹心法测定抗原

A.?????将抗体吸附于固相表面;

B.?????加抗原，形成抗原-抗体复合物;

C.????加酶标抗体;

D.洗液洗去多余?未结合酶标抗体

E.加底物显色。底物的降解量与抗原量有关。;试剂盒组成：;测定步骤;结果判断：;HBV抗原抗体检测结果的临床分析;酶标板;酶标仪;⒈ELISA法有哪几种类型？其原理是什么？

⒉ELISA操作过程中应注意哪些事项？

⒊ELISA的结果判断及临床应用？;胶体金技术（金标法）