CN111768816B 一种大麻哈鱼人工放流群体与自然野生群体的鉴别方法 （中国水产科学研究院黑龙江水产研究所）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(45)授权

(10)授权公告号CN111768816B公告日2021.05.14

(21)申请号202010652315.X

(22)申请日2020.07.08

(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号CN111768816A

(43)申请公布日2020.10.13

(51)Int.CI.

G16C20/70(2019.01)

G16C20/80(2019.01)GO1N27/00(2006.01)

审查员赵子赫

(73)专利权人中国水产科学研究院黑龙江水产研究所

地址150070黑龙江省哈尔滨市道里区河

松街232号

(72)发明人王继隆鲁万桥

刘伟李培伦唐富江

(74)专利代理机构北京东方盛凡知识产权代理

事务所(普通合伙)11562代理人谢秀娟

权利要求书2页说明书4页附图2页

(54)发明名称

一种大麻哈鱼人工放流群体与自然野生群体的鉴别方法

(57)摘要

本发明公开一种大麻哈鱼人工放流群体与自然野生群体的鉴别方法，包括以下步骤：样本前处理、电子微探针分析、数据分析和群体辨别；本发明采集大麻哈鱼回归群体样本，挑取矢耳石开展耳石微化学分析，采用电子微探针技术对矢耳石进行定量线分析，计算大麻哈鱼耳石的R?

CN111768816BR?以及R值，以此为主要判断依据，经验证，按照此方法对大麻哈鱼回归群体检验，判别成功率达100%,且本发明基于目前大麻哈鱼放流苗种培育过程与自然群体大麻哈鱼野外孵化条件的不同，不需对大麻哈鱼放流苗种进行额外的标记，即可对人工增殖群体与自然群体进行有效鉴别，

CN111768816B

CN111768816B权利要求书1/2页

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1.一种大麻哈鱼人工放流群体与自然野生群体的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：样本前处理

采集大麻哈鱼回归群体样本，取出矢耳石进行打磨，打磨至核心，然后对矢耳石进行抛光处理，处理后利用电子微探针分析仪对矢耳石样本进行检测分析；

步骤二：电子微探针分析

利用电子微探针沿着垂直于矢耳石头部、尾部连线且过矢耳石核心的直线，从矢耳石核心至矢耳石背部边缘进行Sr/Ca值的线性定量分析；

步骤三：数据分析

根据步骤二中矢耳石的定量线性分析，绘制矢耳石自核心至边缘的Sr/Ca值的分布曲线，划分大麻哈鱼在淡水、海水中的生活阶段及其他关键特征阶段，然后分别测量大麻哈鱼矢耳石核心至边缘的径长R、早期淡水生活阶段矢耳石径长R?、溯河回归期淡水生活阶段矢耳石径长R?、大麻哈鱼卵黄囊吸收完至幼鱼降海洄游期的矢耳石径长R,再按照矢耳石径长与体长、叉长等正比例关系的经验公式，分别计算各阶段大麻哈鱼的叉长：

式中，R为耳石核心至边缘的径长；L为鱼体叉长；R、L分别为i阶段时的耳石径长和鱼体叉长；

再计算大麻哈鱼的淡水系数R。:

Rc=R?/R

式中，R为自矢耳石核心沿线性定量分析线方向至对应淡水生境区域结束时的径长，R为定量线分析时从矢耳石核心至边缘的耳石径长，R表示淡水系数；

步骤四：群体辨别

根据步骤三计算的各参数，对两群体进行区分，其中自然野生大麻哈鱼早期淡水生活阶段因水温较地下水低，其生长发育较慢，因而R。、R?以及R较人工养殖大麻哈鱼小，范围为：自然野生大麻哈鱼：120μm≤R?≤210μm、20μm≤R?≤40μm、0.06≤Rc≤0.11,人工增殖大麻哈鱼：240μm≤R?≤470μm、80μm≤R?≤200μm、0.15≤R.≤0.30,当数值不完全满足上述范围的情况下，以R值为主要判断依据。

2.根据权利要求1所述的一种大麻哈鱼人工放流群体与自然野生群体的鉴别方法，其特征在于：所述步骤一中，取出矢耳石进行打磨时，取同一侧的矢耳石。

3.根据权利要求1所述的一种大麻哈鱼人工放流群体与自然野生群体的鉴别方法，其

特征在于：所述步骤二中，标准样品使用碳酸钙CaCO?和钛酸锶SrTiO?,电子微探针的机器条件为加速电压15kV,电子束电流2.0×10?A,每点驻留时间为15S,分析束斑直径和间距分别≤5μm和≤10μm。

4.根据权利要求1所述的一种大麻哈鱼人工放流群体与自然野生群体的鉴别方法，其特征在于：所述步骤三中，根据大麻哈鱼生活史特征及耳石微化学分析结果，划分大麻哈鱼在淡水、海水中