CN112961249A 一类基于阿片肽和大麻肽的双功能肽及其制备方法与应用 （兰州大学）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN112961249A

(43)申请公布日2021.06.15

(21)申请号202110211993.7

(22)申请日2021.02.25

(71)申请人兰州大学

A61P25/04(2006.01)

地址730000甘肃省兰州市城关区天水南

路222号

(72)发明人方泉许彪张梦娜张润李宁

(74)专利代理机构江苏圣典律师事务所32237

代理人

肖明芳

(51)Int.CI.

CO7K

19/00(2006.01)

CO7K

1/08(2006.01)

CO7K

1/06(2006.01)

CO7K

1/04(2006.01)

A61K

38/42(2006.01)

A61K38/33(2006.01)

权利要求书1页说明书10页附图3页

(54)发明名称

一类基于阿片肽和大麻肽的双功能肽及其制备方法与应用

(57)摘要

CN112961249A镇痛效应(%MPE)本发明公开了一类基于阿片肽和大麻肽的双功能肽及其制备方法与应用，基于阿片肽DALDA的N端序列与大麻肽(m)VD-Hpa-NH?的C端序列构建而成的全新双功能肽。与现有技术相比，本发明中OCP001和OCP002在体内的镇痛活性有所加强，产生了比母体分子更有效的镇痛效

CN112961249A

镇痛效应(%MPE)

Saline

4nmolOCP001

时间(分钟)

CN112961249A权利要求书1/1页

2

1.一类基于阿片肽DALDA和大麻肽(m)VD-Hpa-NH?的双功能肽，其特征在于，具有式I所示的氨基酸序列，

Tyr-(D)Arg-Phe-Lys-Xaa5-Asp-Pro-Val-Asn-Phe-Lys-Leu-Leu-Ser-His-NH?(I);

其中，Xaa5为Val或缺失。

2.根据权利要求1所述的双功能肽，其特征在于，所述双功能肽具有式Ⅱ所示的氨基酸序列，

Tyr-(D)Arg-Phe-Lys-Val-Asp-Pro-Val-Asn-Phe-Lys-Leu-Leu-Ser-His-NH?(Ⅱ)。

3.根据权利要求1所述的双功能肽，其特征在于，所述双功能肽具有式Ⅲ所示的氨基酸序列，

Tyr-(D)Arg-Phe-Lys-Asp-Pro-Val-Asn-Phe-Lys-Leu-Leu-Ser-His-NH?(Ⅲ)。

4.权利要求1-3中任意一项所述双功能肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将氨基树脂溶胀、抽干；

(2)将步骤(1)所得树脂脱保护，得到脱保护后的树脂；

(3)按照多肽C端至N端的氨基酸序列，加入第一个N-α-Fmoc保护的氨基酸与步骤(2)所得脱保护后的树脂进行缩合反应；加入脱保护试剂脱除氨基酸上的保护基团；然后缩合第二个氨基酸，重复以上步骤，直至多肽链合成完成；

(4)用切割剂将步骤(3)合成的多肽从氨基树脂上进行切割，即得。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述氨基树脂为Rink-Amide-MBHA树脂和Rink-Amide树脂中的任意一种。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述溶胀的溶剂为二氯甲烷；所述溶剂与氨基树脂的体积质量比为8-12mL/g。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述脱保护的试剂为哌啶、1,8-二氮杂环[5,4,0]十一碳-7-烯和N,N-二甲基甲酰胺按照1:1:98的体积比组成的混合溶液；所述脱保护的试剂与抽干后处置的体积质量比为8-12mL/g。

8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述缩合反应为将N-α-Fmoc保护的氨基酸、1-羟基苯并三氮唑、苯并三氮唑-N,N,N,N’-四甲基脲六氟磷酸盐、N,N-二异丙基乙胺按照1:0.2-1.5:0.2-1.5:1.5-3的摩尔比和N,N-二甲基甲酰胺组成的混合溶液，与步骤(2)所得脱保护后的树脂于惰性条件下反应；

其中，所述N,N-二甲基甲酰胺与N-α-Fmoc保护的氨基酸的体积质