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紫外分光光度计操作标准流程

1.目的

本流程旨在规范紫外分光光度计的操作程序，确保分析结果的准确性、重复性与可靠性，同时保障仪器设备的良好运行及操作人员的安全。

2.适用范围

本标准适用于实验室常规使用的紫外可见分光光度计，涉及以紫外光（通常指____nm波长范围）为光源进行物质定性或定量分析的相关操作。

3.安全注意事项

*操作人员上岗前应熟悉仪器性能及本操作规程，非专业人员未经许可不得擅自操作。

*仪器应妥善接地，避免漏电危险。操作过程中注意用电安全。

*紫外光源对眼睛有潜在伤害，严禁在仪器运行时直视样品室内部的紫外光源。如需观察，务必先关闭光源或佩戴适当的防护眼镜。

*涉及有毒有害样品或溶剂时，应在通风橱内进行样品制备，并佩戴相应的个人防护用品（如手套、护目镜）。

*比色皿应轻拿轻放，避免碰撞，防止破损。尤其注意保护光学面，避免划伤或玷污。

4.操作流程

4.1操作前准备

1.环境检查：确认实验室温度、湿度在仪器要求范围内（通常温度15-35℃，相对湿度不大于85%），避免强光直射、剧烈震动及腐蚀性气体。

2.仪器状态检查：检查仪器外观是否完好，电源线、数据线连接是否稳固。样品室内部应清洁、干燥，无杂物。

3.电源检查：确认供电电压稳定且符合仪器要求，将仪器电源开关置于关闭状态。

4.样品制备：

*根据待测试样的特性及实验要求，选择合适的溶剂配制样品溶液。所选用溶剂在测定波长处应具有良好的透光性，且不与样品发生化学反应。

*样品溶液应澄清透明，若有浑浊或悬浮物，需进行过滤或离心处理，确保无气泡。

5.比色皿准备：

*根据测定波长选择合适材质的比色皿（石英比色皿用于紫外区，玻璃比色皿用于可见区）。

*用蒸馏水或待测试样的溶剂清洗比色皿2-3次，若有油污，可用适当的洗涤剂清洗后再用蒸馏水冲洗干净，最后用擦镜纸轻轻擦拭光学面至无痕迹。注意手指只能接触比色皿的磨砂面，避免玷污光学面。

*准备配套的空白溶液（通常为纯溶剂或不含待测组分的溶液）。

4.2开机与预热

1.打开仪器主机电源开关，部分仪器可能需要先打开计算机及相关软件。

2.按照仪器说明书要求进行预热。通常，仪器需预热一定时间（如15-30分钟），以保证光源和检测器的稳定性。预热期间，可进行后续参数设置的准备工作。

4.3仪器参数设置

1.启动仪器操作软件（若为计算机控制型），或直接在仪器操作面板上进行设置。

2.波长设定：根据实验需求，精确设置所需的测定波长。若进行光谱扫描，需设定扫描波长范围、扫描速度及间隔。

3.测量模式选择：选择合适的测量模式，如吸光度（A）、透光率（T%）或浓度（C）等。若选择浓度模式，需先进行标准曲线的绘制或参数输入。

4.带宽选择：根据样品特性和分析要求选择适当的光谱带宽，以平衡分辨率和信噪比。

4.4校准/空白校正

1.将装有空白溶液的比色皿小心放入样品室的比色皿架中，确保光学面对准光路，盖好样品室盖。

2.执行空白校正（或基线校正/调零）操作。仪器将以此空白溶液作为参比，将其吸光度值设定为零（或透光率设定为100%）。

3.空白校正完成后，可取出空白比色皿，准备测量样品。若进行多组样品测量，建议在测量过程中间隔一定时间重新进行空白校正。

4.5样品测量

1.用待测试液润洗比色皿2-3次，以确保比色皿内壁与试液达到平衡。

2.将处理好的样品溶液缓慢注入比色皿中，约占比色皿容积的2/3至3/4，注意避免产生气泡。若有气泡，可轻轻敲击比色皿壁或用滴管尖端将气泡移至液面上部。

3.用擦镜纸再次轻轻擦拭比色皿光学面，确保无指纹、水渍或溶液残留。

4.将样品比色皿按相同方向放入样品室的比色皿架中，盖好样品室盖。

5.待仪器读数稳定后，记录测量数据（如吸光度或透光率）。对于计算机控制型仪器，数据可直接由软件记录。

6.若需测量多个样品，重复步骤4.5.1至4.5.5。每次更换样品时，注意清洁比色皿外壁。

7.同一样品建议进行平行测定（通常2-3次），取平均值作为最终结果，以减少偶然误差。

4.6测量后操作

1.所有样品测量完毕，取出比色皿。

2.立即用蒸馏水或适当溶剂清洗比色皿，倒置晾干或用镜头纸吸干水分后存放于比色皿盒中。若有特殊污染，需用专用洗涤剂清洗。

3.关闭仪器操作软件（若有）。

4.关闭仪器主机电源，断开与电源的连接。

5.清理实验台面，将所用试剂、样品及废弃物按规定处理。

6.填写仪器使用记录，记录使用日期、时间、样品信息、仪器运行状况及操作人员等。

5.数据记录与处理

1.实验数据应及时、准确、清晰地记录在实验记录本上或通过软件保存。记录内容包括