第三章-基因工程.pptVIP

第三章基因工程;第三章基因工程;一、基因组的相关名词

1、DNA：遗传物质脱氧核糖核酸的简称。每个DNA分子都包含螺旋结构的双股链。

2、基因：DNA上有遗传意义的片段叫基因，基因包含一定数量的碱基。是遗传的物质基础，是DNA或RNA分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列。基因是基础的遗传单位，它们决定一个人眼睛的颜色、耳朵的大小、脑容量等所有人的生理特征和一些行为特征。更重要的是，基因与许多疾病有关。;3、测序：确定DNA双股链上每个独立结构单元或碱基的确切顺序的过程。测序经常被称为“破译”，因为其结果就像解码一样。解码结果包含数百页和成千上万行4种字母的序列，这些字母表示4种不同的碱基，它们是腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶，分别用它们的首字母A、T、C、G表示，其排列顺序中蕴藏着各种各样的遗传信息和生命指令。;4、基因诊断:也叫DNA诊断、分子诊断，是通过从患者体内提取样本用基因检测方法来判断患者是否有基因异常或携带病原微生物。目前，基因诊断检测的疾病主要有三大类：感染性疾病的病原诊断、各种肿瘤的生物学特性的判断、遗传病的基因异常分析。

;5、ＤＮＡ芯片，又称基因芯片（ｇｅｎｅｃｈｉｐ），实质上是一种高密度的寡聚核苷酸（ＤＮＡ探针）阵列。它采用在位组合合成化学和微电子芯片的光刻技术，或者利用其他方法将大量特定系列的ＤＮＡ片段（探针）有序地固化在玻璃或磋衬底上，从而构成储存有大量生命信息的ＤＮＡ芯片。

6、所谓转基因技术就是把外源基因整合到动植物基因组中去。下面分别对转基因动物和转基因植物来进行描述。;7、基因突变是指由于DNA碱基对的置换、增添或缺失而引起的基因结构的变化，亦称点突变。

8、人类基因组（ＨｕｍａｎＧｅｎｏｍｅ）：是建立人体所需的化学密码或蓝图，而这幅蓝图的基本组成是ＤＮＡ。ＤＮＡ是一条由磷酸盐和糖组成的分子链，呈双螺旋形，即两条互相缠绕的螺旋形分子带，中间以称为碱基的横条紧扣。除了孪生子女外，每个人的ＤＮＡ都是独一无二的。;9、染色体（Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ）：人体每个细胞内皆有２３对染色体，它们位于细胞的核心，当中染色体ＸＹ是决定性别的。一个人体内所有细胞的染色体的长度加起来，足足有１６００亿公里长。

10、克隆是英文clone的音译，简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式。克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程。;;;Nucleotide;（二）DNA的二级结构

最经典的结构：双螺旋结构

沃森、克里克1953年提出

DNA是由两条多核苷酸链彼此互补并排列方向相反的，以右手螺旋的方式围绕同一根主轴而互相盘绕形成的，具有一定空间距离的双螺旋结构

;沃森（左）和克里克与DNA分子双螺旋结构模型;1.DNA分子有两条反向平行的多聚脱氧核苷酸链组成，一条沿5’--3’，另一条3’--5’，两条链沿一个假想的中心轴右旋相互盘绕，形成大沟和小沟；;DNA与RNA;（三）DNA的存在形式;（四）DNA的复制;;变性（熔解）－在加热或某些试剂的作用下，DNA配对碱基之间的氢键结构受到破坏，双链DNA多核苷酸链能完全分离，此分离过程称为变性。

复性－变性DNA在一定条件下能恢复其双是螺旋结构的过程。;变性

1）变性表象

ａ粘度降低ｂ沉速加快ｃ紫外吸收值增大

2）影响因素

ａDNA本身稳定性ｂ外部条件

3）变性研究

Tｍ;复性

1）影响因素

ａDNA分子的大小和顺序复杂性

ｂ样品的浓度

ｃ溶液的离子强度

ｄ温度

2）复性条件

ａ盐浓度要高ｂ温度要高得适当

3）复性动力学

满足二级动力学

注:复杂度－DNA中最长的没有重复序列的核苷酸对的个数值。;杂交

当复性的DNA分子由不同的两单链分子形成时，称为杂交。

复性是分子杂交的理论基础。;（五）遗传信息的传递;;逆转录和逆转录酶

逆转录－以RNA为模板在逆转录酶催化下合成DNA的过程。

逆转录酶－是一种依赖于RNA的DNA聚合酶。

意义：逆转录和逆转录酶的发现使我们可以用真核ｍRNA为模板，通过逆转录而获得为特定蛋白质编码的基因。

翻译－蛋白质的生物合成;;基因按功能可分三类：

结构基因、操纵区、调控基因

;E.Coli乳糖操纵子的调控;遗传密码

(1)概念：mRNA上的碱基排列顺序，相邻的三个碱基构成一个三联体密码子，代表一个氨基酸的核苷酸序列。

(2)数目：密码子共有64个，其中AUG代表起始密码，UAA、UAG、UGA为中止密码。

P212密码子;（七）RNA

即