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高中生物选修3知识点总结
专题一:基因工程
基因工程,又称基因拼接技术或DNA重组技术,其核心在于按照人们的意愿,将一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。这一技术的实现,依赖于一系列关键的工具和严谨的操作程序。
基因工程的核心原理与工具
基因工程的原理是基因重组。实现这一重组过程,离不开“分子手术刀”、“分子缝合针”和“分子运输车”。
“分子手术刀”即限制性核酸内切酶(简称限制酶)。这类酶主要从原核生物中分离纯化而来,它们能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端或平末端,这些末端为后续的连接提供了位点。
“分子缝合针”指的是DNA连接酶。它的作用是将两个DNA片段连接起来,恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。常用的DNA连接酶有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,它们在作用底物和连接效率上可能存在差异,但核心功能一致。
“分子运输车”则是载体。载体的作用是将目的基因送入受体细胞。作为载体,需要具备一些基本条件:能够在宿主细胞中复制并稳定保存;具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;具有某些标记基因,便于进行筛选。常用的载体有质粒(一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子)、噬菌体的衍生物以及动植物病毒等。
基因工程的基本操作程序
基因工程的操作过程通常包括四个基本步骤:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
目的基因的获取是首要步骤。目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子。获取方法多样,如从基因文库中获取、利用PCR技术扩增目的基因,以及如果基因序列已知,还可以通过化学方法人工合成。PCR技术(聚合酶链式反应)是一种在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术,它能以少量DNA为模板,在短时间内大量扩增目的基因。
基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及标记基因等。启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA。终止子则位于基因的尾端,作用是使转录在所需要的地方停止。标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来,如抗生素抗性基因等。
将目的基因导入受体细胞的方法,因受体细胞的类型不同而有所差异。将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法(农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体DNA上),此外还有基因枪法和花粉管通道法等。导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术,受体细胞多为受精卵。导入微生物细胞则常用感受态细胞法,即用Ca2?处理微生物细胞,使之成为感受态细胞,易于吸收周围环境中的DNA分子。
目的基因的检测与鉴定是确保基因工程成功的关键。这一步骤通常包括四个层次:首先是分子水平的检测,如利用DNA分子杂交技术检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA中,利用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA,利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质;其次,有时还需要进行个体水平的鉴定,如抗虫或抗病的接种实验,以确定转基因生物是否具有预期的性状。
基因工程的应用与发展
基因工程在农业、医药、环境保护等领域展现出巨大的应用潜力。在农业上,主要用于培育高产、优质、抗逆的转基因动植物,如抗虫棉、抗除草剂作物、转基因奶牛等。在医药卫生领域,基因工程药物(如人胰岛素、干扰素、生长激素等)的研制和生产是重要方向,同时基因治疗(把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的)也为许多遗传病和疑难病症的治疗带来了希望。
然而,基因工程也伴随着一些安全性问题和伦理争议,如转基因食品的安全性、基因污染、基因歧视等。因此,在发展基因工程技术的同时,加强规范和引导,确保其健康有序发展至关重要。
专题二:细胞工程
细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据操作对象的不同,可分为植物细胞工程和动物细胞工程。
植物细胞工程
植物细胞工程的理论基础是植物细胞的全能性,即具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。
植物组织培养技术是植物细胞工程的基础。其基本过程是:离体的植物器官、组织或细胞(外植体)经过脱分化形成愈伤组织(一种排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞),愈伤组织再经过再分化形成根或芽等
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