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高中生物选修三知识点总结

引言

高中生物选修三模块聚焦于现代生物技术领域，探讨了基因工程、细胞工程、胚胎工程以及生态工程等核心内容。这些技术不仅是当代生命科学研究的前沿，也日益渗透到我们生活的方方面面。理解这些技术的基本原理、操作流程及其应用前景，对于我们认识生命世界、参与社会议题讨论具有重要意义。本总结旨在梳理该模块的核心知识点，帮助同学们构建清晰的知识框架。

一、基因工程（GeneticEngineering）

基因工程，又称基因拼接技术或DNA重组技术，其核心在于按照人们的意愿，将一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。

（一）核心概念与理论基础

1.基因工程的诞生：得益于分子生物学、遗传学以及微生物学等多学科的发展，特别是限制性核酸内切酶的发现、DNA连接酶的应用以及载体的构建，为基因工程的诞生奠定了技术基础。

2.理论基础：不同生物的DNA分子结构基本相同，都遵循碱基互补配对原则，这使得不同生物的基因能够“拼接”在一起；所有生物共用一套遗传密码，这使得一种生物的基因能够在另一种生物体内表达。

（二）基因工程的基本工具

1.限制性核酸内切酶（RestrictionEndonuclease）：

*来源：主要从原核生物中分离纯化得到。

*功能：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

*结果：切割后产生黏性末端或平末端。

2.DNA连接酶（DNALigase）：

*功能：将两个双链DNA片段连接起来，形成磷酸二酯键，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

*种类：常用的有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，后者对黏性末端和平末端都能起连接作用。

3.载体（Vector）：

*功能：将目的基因送入受体细胞的“运输工具”。

*必备条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接；具有标记基因，便于进行筛选。

*常用载体：质粒（细菌中独立于拟核DNA之外的小型环状DNA分子）、噬菌体、动植物病毒等。

（三）基因工程的基本操作程序

1.目的基因的获取：

*从基因文库中获取：包括基因组文库和cDNA文库。

*利用PCR技术扩增目的基因：PCR即聚合酶链式反应，是一种在生物体外快速扩增特定DNA片段的技术。其原理是DNA双链复制，需要模板DNA、引物、四种脱氧核苷酸以及热稳定DNA聚合酶（如Taq酶）。

*人工合成：适用于核苷酸序列已知且分子量较小的基因。

2.基因表达载体的构建（核心步骤）：

*组成：通常包括目的基因、启动子（RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录）、终止子（使转录停止）、标记基因（用于筛选含有目的基因的受体细胞）等。

*过程：用同一种限制酶切割目的基因和载体，使其产生相同的黏性末端（或平末端），再用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来，形成重组DNA分子。

3.将目的基因导入受体细胞：

*植物细胞：常用农杆菌转化法（利用农杆菌Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞并整合到其染色体DNA上的特性）、基因枪法、花粉管通道法。

*动物细胞：最常用的是显微注射技术，将重组DNA分子直接注入受精卵。

*微生物细胞（如大肠杆菌）：常用Ca2?处理法，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态细胞）。

4.目的基因的检测与鉴定：

*分子水平的检测：

*检测目的基因是否导入：利用DNA分子杂交技术（如Southernblotting）。

*检测目的基因是否转录出mRNA：利用分子杂交技术（如Northernblotting）或RT-PCR技术。

*检测目的基因是否翻译成蛋白质：利用抗原-抗体杂交技术（如Westernblotting）。

*个体水平的鉴定：通过观察受体生物是否表现出目的基因所控制的性状，如抗虫性、抗病性等。

（四）基因工程的应用与发展前景

1.在医药卫生领域：生产基因工程药物（如胰岛素、干扰素、生长激素等）、用于基因诊断（如DNA探针技术）和基因治疗（将正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的）。

2.在农业领域：培育抗虫、抗病、抗逆（如抗除草剂、抗盐碱）的转基因作物；改良作物品质（如黄金大米）；培育转基因动物（如乳腺生物反应器）。

3.在环境保护领域：用于环境监测（如利用基因工程菌检测有毒物质）、污染治理（如利用基因工程菌降解有毒有害化合物）。

4.发展前景：随着技术的不断进步，基因编辑技术（如CRISPR-C