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研究报告

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一例猪大肠杆菌病的诊断

一、病例概述

1.病例基本信息

(1)本病例为一起典型的猪大肠杆菌病案例，发生在我国某规模化养猪场。该猪场共有存栏猪1000头，其中育肥猪800头，后备母猪200头。病例发生时间为2022年5月，共计持续了3周。在这段时间内，共有120头猪出现症状，其中死亡30头，死亡率达到25%。病例首次发现于猪舍的中间区域，随后迅速蔓延至整个猪场。

(2)病猪的主要症状包括腹泻、食欲不振、体重下降、精神萎靡等。腹泻症状表现为水样或糊状粪便，带有恶臭。部分病猪出现脱水和酸中毒现象，表现为皮肤弹性下降、黏膜干燥、心率加快等。在病猪群体中，以育肥猪的发病率最高，后备母猪次之。

(3)病料采集工作在病例发生后立即进行，共采集了30头病猪的粪便、肠道内容物和血液样本。经实验室检测，粪便和肠道内容物样本中大肠杆菌的检出率为80%，血液样本中大肠杆菌的检出率为50%。此外，通过对病猪的饲养管理、饲料来源、环境消毒等方面进行调查，发现该猪场存在饲料污染、猪舍通风不良、消毒不彻底等问题，这些都是导致猪大肠杆菌病发生的重要因素。

2.临床表现

(1)病猪的临床表现多样，主要包括腹泻、食欲减退和体重下降。在本次病例中，腹泻症状是最常见的，约占所有病例的85%。病猪的粪便呈现水样或糊状，颜色呈黄色或灰白色，有时带有血丝。据调查，病猪的日腹泻次数平均为5-7次。

(2)食欲减退是病例中的另一个主要症状，几乎所有病猪都会出现。病猪的采食量减少，食欲不振，有时甚至拒食。这一症状通常在病猪出现腹泻后的第2-3天开始显现，持续时间为1-2周。在此期间，病猪的体重平均每天下降约0.3-0.5公斤。

(3)除了腹泻和食欲减退，病猪还可能出现精神萎靡、体温升高、皮肤干燥、脱水等症状。体温升高病例占20%，平均体温升高至40.5-41.5摄氏度。脱水和酸中毒是病例中的严重并发症，约占病例的15%，表现为皮肤弹性下降、黏膜干燥、心率加快等。在病例高峰期，每日因脱水死亡病例数为5-10头。

3.流行病学调查

(1)流行病学调查发现，本次猪大肠杆菌病的发生与猪舍的饲养密度密切相关。调查数据显示，病猪所在的猪舍密度为每平方米12头猪，远高于猪场其他猪舍的每平方米8头猪的密度标准。高密度饲养导致猪舍内空气质量恶化，粪便和尿液积累，为病原菌的滋生提供了条件。

(2)在病例发生前的一个月内，猪场从外部引进了50头后备母猪，这些新引进的猪只未经严格的隔离和检疫程序。经调查，引进猪中有15头携带有大肠杆菌，这可能是病例发生的一个重要原因。此外，引进猪与原有猪只的混群饲养也加剧了病原菌的传播。

(3)饲料和水源的污染也是病例发生的重要因素。调查发现，猪场的饲料原料中混入了大肠杆菌污染的原料，导致饲料大肠杆菌超标。同时，猪舍的水源检测也发现大肠杆菌含量超标，这表明水源污染可能是病原菌传播的另一个途径。此外，猪场的消毒措施不彻底，未能有效杀灭猪舍内的病原菌，也为病例的发生提供了条件。

二、病原学检查

1.病料采集

(1)在本次猪大肠杆菌病病例中，病料采集工作是在病例发生后立即启动的。采集人员身着防护服，佩戴口罩和手套，以防止交叉感染。共采集了30头病猪的粪便、肠道内容物和血液样本。粪便样本采集时，确保从病猪新鲜排出的粪便中获取，以避免样本中的细菌数量因时间延长而减少。肠道内容物样本则是从猪的肠道中取出，特别是病变部位。

(2)粪便样本的采集量平均为20克，肠道内容物样本采集量平均为30克。血液样本的采集则是通过颈静脉采血，每头病猪采集量为10毫升。所有采集的样本均在采集后2小时内送至实验室进行检测。在实验室中，粪便和肠道内容物样本经过离心处理，以分离出细菌。血液样本则用于检测抗体水平和细菌培养。

(3)实验室检测结果显示，粪便和肠道内容物样本中大肠杆菌的检出率为80%，其中O157:H7血清型大肠杆菌的检出率为15%。血液样本中大肠杆菌的检出率为50%，这表明病猪体内存在大肠杆菌感染。此外，通过对采集样本的病原学分析，发现病猪的粪便和肠道内容物中的大肠杆菌数量平均为每克10^8个CFU，血液中的大肠杆菌数量平均为每毫升10^6个CFU。这些数据表明，病猪体内的细菌载量较高，感染程度严重。

2.细菌培养

(1)在本次猪大肠杆菌病病例的细菌培养过程中，实验室严格按照标准操作程序进行。首先，采集的病料样本经过初步处理，包括粪便和肠道内容物的稀释和血液样本的分离血清。处理后的样本立即接种于伊红美蓝琼脂平板和麦康凯琼脂平板上，这两种培养基分别用于观察大肠杆菌的菌落特征。

(2)接种后的平板在37摄氏度恒温培养箱中培养18-24小时。培养期间，观察菌落生长情况。伊红美蓝琼脂平板上，大肠杆菌菌落通常呈现深紫色，