微生物的选择培养与计数课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

1.2.2微生物的选择培养和计数

学习目标1.过分析选择培养的原理，形成生物与环境相适应的观点。2.通过归纳总结微生物的分离及计数的常用方法，培养归纳与概括、分析与综合的科学方法。3.运用微生物分离及计数的常用方法，设计从土壤中分离分解尿素的细菌并进行计数的实验方案。4.运用微生物的选择培养与计数的方法，解决生产生活中的相关问题。

123选择培养基微生物的选择培养微生物的数量测定目录

一.选择培养基

501选择培养基1.概念:2.类型:在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。类型条件分离得到的菌种改变培养条件70～80℃的高温添加某种化学物质加入青霉素高浓度食盐特殊碳、氮源石油是唯一碳源营养缺陷不加碳源不加氮源水生栖热菌酵母菌、霉菌等真菌金黄色葡萄球菌能消除石油污染的微生物自养型微生物固氮菌

601选择培养基尿素的立体结构【思考·讨论】尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可以为细菌生长的氮源。CO(NH2)2脲酶+H2O+CO22NH3

701选择培养基【思考·讨论】在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。1.将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml选择培养基思考：该选择培养基就一定起到选择作用吗？如何证明选择培养基具有选择作用呢？

801选择培养基【思考·讨论】牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000ml培养基一KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml培养基二完全培养基选择培养基思考：该选择培养基就一定起到选择作用吗？如何证明选择培养基具有选择作用呢？以完全培养基为对照，进行与选择培养基同样的实验操作过程，来证明选择培养基的选择作用。若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。

901选择培养基2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？【思考·讨论】除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。思考：仅通过选择培养基可以知道1g土塘中有多少能分解尿素的细菌吗？

1g土壤中有多少能分解尿素的细菌？分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物计数：测定分解尿素的细菌的数量用平板划线法接种培养结果的图片如下。请结合图片分析，平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的？为什么？不能，平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。

二.微生物的选择培养

微生物的选择培养研究课题：1g土壤中有多少能分解尿素的细菌分离：获得尿素分解菌的纯培养物计数：测定尿素分解菌数量二、微生物的选择培养

1.选择培养基的作用：分离并计数某种微生物的数量（例如，能分解尿素的细菌）。选择培养基+稀释涂布平板单菌落2.微生物选择培养获取纯培养物的方法：稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。二、微生物的选择培养稀释涂布平板法主要过程:①梯度稀释菌液②涂布平板

微生物的选择培养土壤取样样品的稀释涂布平板微生物的培养与观察土壤微生物存在土壤中，怎么选择合适的土壤？土壤收集后能不能直接倒入平板内培养？该怎么操作？取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。操作完成后，一定要洗手。3.土壤中分解尿素的细菌的分离二、微生物的选择培养

微生物的选择培养土壤取样样品的稀释涂布平板微生物的培养与观察1×101mL1mL1mL1mL1mL1mL10210310410510610710g9mL无菌水90mL无菌水3.土壤中分解尿素的细菌的分离二、微生物的选择培养

微生物的选择培养土壤取样样品的稀释涂布平板微生物的培养与观察1×101mL1mL1mL1mL1mL1mL10210310410510610710g9mL无菌水90mL无菌水测定细菌1ⅹ104、1ⅹ105、1ⅹ106测定放线菌1ⅹ103、1ⅹ104、1ⅹ105测定真菌1ⅹ102、1ⅹ