苹果斑点落叶病：病菌侵染机制、抗感病SSR分子标记开发与种质资源评价研究.docxVIP

苹果斑点落叶病：病菌侵染机制、抗感病SSR分子标记开发与种质资源评价研究

一、引言

1.1研究背景与意义

苹果作为世界上广泛种植且深受消费者喜爱的水果之一，在全球水果产业中占据着举足轻重的地位。中国是苹果生产大国，种植面积和产量均位居世界首位，苹果产业在促进农民增收、推动农村经济发展以及保障水果市场供应等方面发挥着关键作用。然而，苹果产业的发展面临着诸多挑战，其中苹果斑点落叶病是影响苹果生产的重要病害之一。

苹果斑点落叶病是由链格孢苹果专化型（Alternariaalternataf.sp.mali）侵染引起的一种世界性分布的气传病害。该病害主要危害苹果叶片，也可侵染嫩枝和果实。发病初期，叶片上出现褐色圆形斑点，周围有紫褐色晕圈，随后病斑逐渐扩大，多个病斑融合成不规则大斑，导致叶片穿孔、破碎、生长停止，严重时幼叶扭曲变形、提早脱落。叶柄、一年生枝和内膛徒长枝染病后，皮孔突起，产生褐色至灰褐色凹陷病斑，边缘常开裂。幼果至成熟果均可遭受侵染，感病果实以皮孔为中心产生近圆形褐色斑点，周围有红晕，病斑下果肉数层细胞变褐，呈木栓化干腐状，贮藏期病果在低温下病斑扩大，遇高温时易受其他病菌侵染导致果实腐烂。

苹果斑点落叶病的发生严重影响苹果的产量和品质。在病害发生严重的果园，7-8月间病叶率可达90%以上，落叶率为20%-80%，削弱树势，降低产量，甚至影响下一年的果实生长。此外，病害还会导致果实品质下降，商品价值降低，给果农带来巨大的经济损失。同时，为了防治苹果斑点落叶病，果农通常会大量使用化学农药，这不仅增加了生产成本，还会对环境造成污染，威胁生态平衡和食品安全。

因此，深入研究苹果斑点落叶病病菌侵染过程，开发苹果抗感病SSR分子标记，并将其应用于苹果种质资源评价，对于揭示苹果斑点落叶病的发病机制、培育抗病品种、减少化学农药使用、促进苹果产业的可持续发展具有重要意义。通过研究病菌侵染过程，可以明确病菌的侵染途径、侵染时间和侵染条件，为制定有效的防治措施提供理论依据。开发苹果抗感病SSR分子标记，能够实现对苹果抗感病基因的快速、准确检测，加速苹果抗病育种进程。将SSR分子标记应用于苹果种质资源评价，可以筛选出具有优良抗病性状的种质资源，为苹果品种改良和新品种培育提供丰富的遗传材料。

1.2国内外研究现状

1.2.1苹果斑点落叶病病菌侵染过程研究进展

国内外学者对苹果斑点落叶病病菌侵染过程进行了大量研究。研究表明，病原菌以菌丝体在落叶、1年生枝病斑组织、皮孔以及休眠芽内越冬。翌年春季，越冬部位产生分生孢器，释放出分生孢子，随气流传播。春季苹果树发芽前后，约从4月下旬起，越冬病菌产生分生孢子，分生孢子从叶片气孔侵入发生初侵染。5月上旬到中旬开花前后，叶片开始发病出现病斑，20天后即开始产生分生孢子，这些孢子可再次侵染。6月下旬发病激增，7、8月进入发病盛期，发病严重的病叶率可达80%-90%，并大量落叶。8月下旬至9月上旬北方天气渐凉，大部分叶片老化，病害呈明显的下降趋势。

在侵染机制方面，研究发现病菌侵染与叶片的生理状态密切相关。叶龄20天内的嫩叶易受侵染，30天以上叶不再感病，这可能与嫩叶的组织结构和生理生化特性有关。此外，环境因素如温度、湿度、光照等对病菌侵染也有重要影响。高温多雨易发病，春季干旱年份，始发期延迟；夏季降雨多，发病重。在20-30℃温度下，叶片上有5小时以上水膜，即可完成侵染。光照和光源性质对菌丝的影响不大，但对产孢量影响较大，黑光灯（波长360-400纳米）照射能促进产孢，而自然散射光则抑制产孢。

1.2.2苹果抗感病分子标记开发研究进展

分子标记技术的发展为苹果抗感病基因的研究提供了有力工具。目前，在苹果抗感病分子标记开发方面，已经取得了一些重要进展。RAPD（RandomAmplifiedPolymorphicDNA）、RFLP（RestrictionFragmentLengthPolymorphism）、AFLP（AmplifiedFragmentLengthPolymorphism）、SSR（SimpleSequenceRepeat）等分子标记技术被广泛应用于苹果抗感病基因的标记和定位研究。

有研究以秦冠、富士及其杂交F代为试材，进行了抗病基因RAPD标记，获得1个与抗斑点落叶病基因连锁的RAPD标记S428-854，并成功转换为SCAR标记SCAR470。也有利用AFLP技术分析苹果属植物的遗传多样性和分类，为苹果抗感病基因的研究提供了基础。SSR分子标记由于具有多态性高、重复性好、共显性遗传等优点，在苹果抗感病分子标记开发中具有广阔的应用前景。然而，目前已开发