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细胞培养基无菌配制技师（初级）考试试卷及答案

细胞培养基无菌配制技师（初级）考试试卷及答案

一、填空题（共10题，每题1分）

1.常用细胞培养基中，含酚红作为pH指示剂的是______（如DMEM、RPMI1640等）。

2.培养基无菌过滤常用的滤膜孔径是______μm。

3.血清灭活的温度通常是______℃，时间30分钟。

4.高压蒸汽灭菌的温度为______℃，维持15-20分钟。

5.细胞培养基中补充的L-谷氨酰胺是______（必需/非必需）氨基酸。

6.超净工作台使用前，紫外消毒时间一般为______分钟。

7.培养基储存的适宜温度是______℃，避光密封。

8.防止细菌污染常用的抗生素组合是______（青霉素+链霉素）。

9.无菌操作时，手部需用______酒精消毒。

10.细胞培养基的正常pH范围是______（7.2-7.4）。

答案：

1.DMEM（或RPMI1640）；2.0.22；3.56；4.121；5.必需；6.30；7.4；8.青霉素-链霉素；9.75%；10.7.2-7.4

二、单项选择题（共10题，每题2分）

1.以下哪种方法可实现培养基的无菌处理？

A.煮沸消毒B.过滤灭菌C.干热灭菌D.紫外线照射

2.血清灭活的主要目的是去除：

A.细菌B.真菌C.补体D.支原体

3.超净工作台开启顺序正确的是：

A.先开紫外→再开风机→后开照明B.先开风机→再开紫外→后开照明

C.先开照明→再开紫外→后开风机D.先开紫外→再开照明→后开风机

4.培养基pH偏酸时，常用的调整试剂是：

A.HClB.NaOHC.NaHCO?D.醋酸

5.以下哪种滤膜不能用于无菌过滤？

A.0.22μm醋酸纤维素膜B.0.45μm聚醚砜膜

C.0.22μm尼龙膜D.0.22μm聚四氟乙烯膜

6.无菌操作时，物品应放置在超净台的：

A.边缘区域B.中间区域C.靠近风机处D.远离酒精灯处

7.培养基储存超过多久需重新无菌检查？

A.1周B.2周C.1个月D.3个月

8.以下哪种物质是细胞培养基的“必需生长因子”？

A.葡萄糖B.维生素CC.血清D.氨基酸

9.超净台HEPA过滤器的更换周期一般为：

A.6个月B.1年C.2年D.3年

10.若培养基出现浑浊，最可能的原因是：

A.血清沉淀B.细菌污染C.pH变化D.滤膜破损

答案：

1.B；2.C；3.A；4.C；5.B；6.B；7.C；8.C；9.B；10.B

三、多项选择题（共10题，每题2分，多选、少选均不得分）

1.细胞培养基的基本成分包括：

A.氨基酸B.维生素C.血清D.抗生素

2.无菌操作的防护要求有：

A.戴口罩B.戴无菌手套C.穿无菌衣D.关闭超净台风机

3.培养基过滤的注意事项包括：

A.滤膜完整性检查B.压力控制在0.1-0.2MPaC.过滤前预湿滤膜D.可重复使用滤膜

4.血清的作用有：

A.提供营养物质B.补充生长因子C.缓冲pHD.去除支原体

5.高压灭菌的注意事项包括：

A.排气彻底B.物品摆放不超过容器80%C.灭菌后立即打开D.液体灭菌需留空隙

6.培养基无菌检查的指标有：

A.无浑浊B.无沉淀C.无菌落生长D.pH正常

7.超净台维护的要点包括：

A.定期清洁工作台面B.更换HEPA过滤器C.每月检测风速D.紫外灯每年更换

8.细胞培养基中常用的pH缓冲体系有：

A.NaHCO?-CO?B.HEPESC.醋酸-醋酸钠D.磷酸缓冲液

9.防止支原体污染的措施有：

A.血清过滤B.培养基过滤C.定期支原体检测D.避免交叉操作

10.培养基配制的关键步骤包括：

A.准确称量成分B.溶解完全C.调整pHD.无菌过滤

答案：

1.ABC；2.ABC；3.ABC；4.ABC；5.ABD；6.AC；7.ABC；8.AB；9.ABCD；10.ABCD

四、判断题（共10题，每题2分，对打√，错打×）

1.培养基配制后可直接用于细胞培养。（×）

2.血清灭活可去除所有微生物。（×）

3.超净台紫外消毒后需通风30分钟再操作。（√）

4.0.45μm滤膜可用于无菌过滤。（×）

5.培养基应储存于-20℃冰箱。（×）

6.无菌操作时，手可触碰超净台内壁。（×）

7.L-谷氨酰胺易分解，应现用现加。（√）

8.抗生素需过滤后加入培养基。（√）

9.培养基pH下降提示可能细菌污染。（√）

10.超净台风机开启时可关闭紫外灯。（√）

答案：

1.×；2.×；3.√；4.×；5.×；6.×；7.√；8.√；9.√；10.√

五、简答题（共4题，每题5分，答案200字左右）

1.简述细胞培养基无菌配制的基本步骤。

答案：

①准备无菌器材（滤器、培养瓶等，经高压灭菌）；②准确称量培养基干粉，加入双蒸水溶解；③调整pH至7.2-7.4；④加入血清、抗生素、L-谷氨酰胺等添加