蛋白质工程：改造基因与蛋白质，开创生物工程新纪元.pptx

ProteinEngineering

蛋白质工程

;第一节概述;蛋白质工程的长远目标是创造人类所需要的各种性能优越的人造蛋白质。但目前主要是通过基因突变手段以制取天然蛋白质的各种人工突变产物。

二.蛋白质工程的产生及主要内容

人们在研究蛋白质结构与功能关系时,通过改变其结构,观察相应功能的改变,以弄清某一功能的结构基础,希望达到创造某些具有明显经济效益的新的蛋白质。;1、过去常用诱导变异或从自然界筛选具有不同性质的突变体的方法。

缺点：不能保证在获得一种有利的突变时不会损害另一优良性能.。

2、蛋白质化学修饰方法。

缺点：不够专一,对分子内部的一些疏水氨基酸的侧链也无法予以修饰。

3、化学合成。

缺点：虽然可以按照人们的要求制造那些分子量不大的蛋白质和肽类,但对于制造分子量大于1万道尔顿的蛋白质的设想，从经济和技术上考虑,这一技术均不能满足工业用酶或蛋白质的要求。;上个世纪70年代遗传工程的兴起给蛋白质研究以巨大冲击,但也促进了蛋白质化学与遗传工程领域的结合,与此同时又汇入蛋白质晶体学和计算机技术,进而在80年代初兴起了一个新的研究领域即蛋白质工程。

;综合蛋白质结晶学、计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科的基础知识，在基因或蛋白质分子水平进行操作，从而达到对蛋白质进行修饰、改造、拼接以生产能满足人类需要的新型蛋白质;蛋白质工程的流程图;目前改变自然界存在的酶或蛋白质本身的某些缺点已成为蛋白质工程的主要目标之一。

目前蛋白质工程的主要目标及可采取的措施

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目标可采取的措施实例

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提高对热T4溶菌酶

稳定性

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增加对pH葡萄糖

稳定性异构酶

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增强抗氧枯草杆菌

化能力

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增强抗重①将Cys置换为Ala或Ser过氧化物

金属离子②改变分子表面的羧基酶

的能力;─────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────

①改进酶的专一性酪氨酰tRNA

改进酶学性质合成酶

②改变酶的最适pH胰蛋白酶

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遗传工程可以使在人类控制的条件下生产任何自然界中已存在的蛋白质以满足人类的需要。蛋白质工程的出现可使人类可以生产自然界根本不存在的,但其性质又是人类所期望的新型蛋白质。因此蛋白质工程又称为第二代遗传工程。;蛋白质工程就是根据蛋白质的精细结构和生物活力的作用机制之间的关系，利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至于创造