分子克隆常用工具酶.ppt

T4DNAligaseE.coliDNAligase来源T4噬菌体大肠杆菌分子量6000075000辅助因子ATPNAD+底物双链DNA分子的粘、平端RNA-DNA杂合体,RNA链缺口、双链DNA分子中的单链缺口同源互补粘端双链分子中的单链缺口应用范围广泛、效率高窄两种DNA连接酶比较二、常用连接酶植物基因工程第31页,共71页。连接反应的温度是影响转化效率的最重要参数。多数内切酶产生的粘性末端的Tm值在15℃以下,然而保持连接酶活性的最佳反应温度却是37℃ 但在该温度下,粘性末端之间的氢键结合是不稳定的,因此最适温

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