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细胞培养基成分分析技师（初级）考试试卷及答案

细胞培养基成分分析技师（初级）考试试卷及答案

一、填空题（每题1分，共10分）

1.细胞培养基最常用的碳源是______。

2.哺乳动物细胞培养基常添加的血清是______血清。

3.高压蒸汽灭菌的温度是______℃（15-30分钟）。

4.细胞培养基pH通常维持在______左右（7.0-7.4）。

5.细胞培养用水需经______处理（如超纯水）。

6.谷氨酰胺在培养基中主要提供______。

7.无血清培养基不含______。

8.过滤除菌常用滤膜孔径是______μm。

9.培养基常用缓冲体系是______（如HEPES）。

10.植物细胞培养基凝固剂是______。

答案：1.葡萄糖；2.胎牛；3.121；4.7.2；5.去离子/纯化；6.氮源；7.血清；8.0.22；9.碳酸氢钠-二氧化碳；10.琼脂

二、单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下不是培养基基本成分的是？

A.碳源B.氮源C.抗生素D.血清

2.高压蒸汽灭菌不能去除的是？

A.细菌B.芽孢C.内毒素D.真菌

3.谷氨酰胺的主要作用是？

A.调节pHB.供能C.合成蛋白质D.抗氧化

4.属于合成培养基的是？

A.MEMB.血清培养基C.组织提取液D.天然培养基

5.过滤除菌滤膜孔径选？

A.0.1μmB.0.22μmC.0.45μmD.1.0μm

6.培养基pH下降的主要原因是？

A.细胞产乳酸B.CO?逸出C.水分蒸发D.血清分解

7.无血清培养基的缺点是？

A.成分明确B.避免污染C.价格高D.便于标准化

8.必需生长因子是？

A.胰岛素B.葡萄糖C.氯化钠D.水

9.培养基灭菌后浑浊的原因是？

A.灭菌不彻底B.滤膜破损C.水不纯D.成分沉淀

10.蔗糖在植物培养基中不具有的作用是？

A.碳源B.渗透压调节C.促进分化D.抗氧化

答案：1.D；2.C；3.C；4.A；5.B；6.A；7.C；8.A；9.A；10.D

三、多项选择题（每题2分，共20分）

1.培养基基本营养成分包括？

A.碳源B.氮源C.维生素D.无机盐

2.培养基灭菌方法有？

A.高压蒸汽灭菌B.过滤除菌C.干热灭菌D.紫外线照射

3.血清的作用包括？

A.提供生长因子B.调节渗透压C.结合毒素D.促进贴壁

4.无血清培养基添加物有？

A.生长因子B.激素C.载体蛋白D.抗生素

5.影响培养基pH的因素有？

A.细胞代谢B.CO?浓度C.温度D.培养基成分

6.合成培养基包括？

A.RPMI1640B.DMEMC.MEMD.天然培养基

7.添加抗生素的目的是？

A.预防细菌污染B.预防真菌污染C.杀灭细菌D.杀灭真菌

8.常用缓冲体系有？

A.碳酸氢钠-CO?B.HEPESC.TrisD.磷酸缓冲液

9.植物培养基成分包括？

A.大量元素B.微量元素C.植物激素D.碳源

10.培养基质量控制指标有？

A.无菌性B.pH值C.渗透压D.细胞生长率

答案：1.ABCD；2.AB；3.ACD；4.ABCD；5.ABCD；6.ABC；7.ABCD；8.AB；9.ABCD；10.ABCD

四、判断题（每题2分，共20分）

1.所有培养基必须加血清。（×）

2.灭菌温度越高效果越好。（×）

3.谷氨酰胺需新鲜添加。（√）

4.0.22μm滤膜可去除所有细菌真菌。（√）

5.培养基渗透压应与细胞内液相近。（√）

6.无血清培养基成分更明确。（√）

7.灭菌后培养基需立即使用。（×）

8.维生素是非必需成分。（×）

9.植物培养基用琼脂凝固。（√）

10.抗生素可完全避免污染。（×）

五、简答题（每题5分，共20分）

1.简述培养基中碳源的作用及常用碳源。

答案：碳源是细胞能量主要来源，参与合成碳水化合物、脂肪、蛋白质等。常用碳源：哺乳动物细胞用葡萄糖（代谢产乳酸）；植物细胞用蔗糖（供能+调节渗透压）；部分细胞可利用半乳糖、果糖。需控制浓度避免pH波动。

2.血清在培养基中的主要作用？

答案：提供生长因子（胰岛素、EGF等）、激素、载体蛋白（结合维生素/微量元素）；促进细胞贴壁（黏附因子）；结合代谢毒素减轻毒性；调节渗透压/pH。但成分复杂易污染，无血清培养基可替代。

3.培养基过滤除菌的操作要点？

答案：①选0.22μm滤膜；②滤器高压灭菌；③超净台无菌操作；④控制压力避免滤膜破损；⑤过滤后取样培养验证无菌；⑥避免反复过滤减少成分损失。

4.无血清培养基的优缺点？

答案：优点：成分明确，无血清污染（病毒/支原体），实验重复性好，可针对性加生长因子。缺点：成本高，部分细胞需优化配方，贴壁性下降需加黏附因子。

六、讨论题（每题5分，共10分）

1.如何判断培养基污染？预防措施有哪些？

答案：判断：①肉眼：浑浊、菌膜/沉淀；②镜检：细菌（黑点）、真菌