蛋白生物素化实验步骤
A.计算公式
生物素标记的程度取决于蛋白质上氨基的分布、蛋白质浓度和所用试剂的量。与涉及浓缩蛋
白溶液的反应相比,使用稀释溶液的标记反应需要更高摩尔倍数的生物素试剂以实现相同的
掺入水平。如果使用20倍摩尔过量的生物素试剂标记1-10mg/mL抗体(在0.5-2mL中),
则每个抗体分子标记4-6个生物素基团。如果使用50倍摩尔的生物素试剂标记50-200μg
抗体(在200-700μL中),则每个抗体分子标记1-3个生物素基团。调节Sulfo-NHS-Bio
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