生化药物和基因工程药物分析概念课件.pptxVIP

生化藥物和基因工程藥物分析概念;基本要求;

一、防病、治

病的三大藥源;1．生化藥物：

例：氨基酸、多肽、蛋白質、酶等。

;2.基因工程藥物：

以DNA重組技術生產的蛋白質、多肽、酶、激素、疫苗、單克隆抗體和細胞生長因數類藥物。;DNA重組技術（基因工程）：生產過程為;二、種類;2．基因工程藥物的種類

1）激素類及神經遞質類藥物：

人生長激素釋放抑制因數、人胰島素、人生長激素

2）細胞因數類藥物：

人干擾素人白細胞介素、集落刺激因數、促紅細胞生成素

3）酶類及凝血因數類藥物

;三、特點

1.生物體的基本生化成分

2.分子量大:分子量測定

3.結構難確證

4.全過程的品質控制：原料、生產過程、

最終產品

5.生物活性檢查

;6.安全性檢查

7.效價（含量）測定：

理化法：有效成分的含量

效价测定和酶活力测定：有效成分

的生物活性;

生化藥物和基因藥物品質控制的專案：

来源与种类纯度

性状干燥失重或水分

鑒別熾灼殘渣

氨酸组分分析生物活性

肽图热源试验

糖含量含量分析

;

;（一）理化鑒別法

1.化學鑒別法：

例：溶菌酶-CONH-+Cu2+絡合顯色;

2.紫外分光光度法

溶劑：0.01mol/L鹽酸

例：三磷酸腺苷二鈉濃度：20μg/ml

判斷：λmax：257±1nm

A250/A260：0.17～0.27。

3.HPLC法：

利用對照品溶液和供試品溶液色譜圖的保留

時間和肽圖譜的一致性進行鑒別。

;4.酶法：

例：尿激酶的鑒別---氣泡上升法

原理：;

方法：

取小試管，加入尿激酶巴比妥溶液、牛纖維蛋白原溶液，再依次加入牛纖維蛋白溶酶原溶液、牛凝血酶溶液，迅速搖勻，立即置37℃±0.5℃恒溫水浴保溫，記時。反應系統在30～40秒內凝結，凝結塊內有氣泡生成，15分鐘內凝結塊溶解，當凝結塊溶解時，氣泡逐漸上升。以0.9%氯化鈉作空白，同法操作，凝結塊在2小時內不溶。

;5.電泳法：以肝素鑒別為例。;6.生物法：

利用生物體進行試驗來鑒別藥物。

例：家兔驚厥試驗鑒別胰島素。

利用胰島素的降糖作用。給家兔大劑量注射胰島素，家兔驚厥，迅速靜注50%GS，驚厥停止。;（二）雜質檢查

一般雜質檢查

特殊雜質檢查：原料藥純度分析

生产过程中杂质的检查

1.原料藥純度分析：

多糖类-----低聚糖、核酸、蛋白質

酶類藥物-----酶催化反應基本產物的分析，

具有一定活性的其他有關酶的檢查。

;例：胰蛋白酶中糜蛋白酶的檢查

選用N-乙醯-L-酪氨酸乙酯作底物進行糜蛋白酶的限度檢查。糜蛋白酶的限度為2500個胰蛋白酶單位中不得大於50單位，按每1mg胰蛋白酶為2500個單位和每1mg糜蛋白酶為1000單位，折算成重量，則糜蛋白酶的限度為5%（g/g）。

1:1000=x:50x=0.05（mg）L=0.05/1=5%

2.生產過程中雜質的檢查;（三）安全性試驗

熱源試驗

異常毒性試驗:急性毒性物質

過敏試驗：異性蛋白

降压物质试验：导致血压降低的杂质、组

胺、类组胺

;無菌試驗：活菌

基因工程藥物中可能雜質與污染物檢查

来源于宿主细胞的残留DNA，外源性雜質

致突變試驗

生殖毒性试验;（四）含量測定

生化藥物和基因藥物的含量表示方法：

百分含量：適用於結構明確的小分子藥

物或經水解後變成小分子的

药物。

生物效价