苦豆子类生物碱抗乙型肝炎病毒作用及机理研究.pdfVIP

种苦ti了类生物碱抗乙型”!炎纳毒作J月及其机理初探

Fig2.3Dose-EffectcurveofBanlangenonDHBVDNAinserumofduckswithDHBV(n=6)

d0,d5,d10,d13:administingfor0,5,10,13daysandstopfor3days.

将10天的抑制率对剂量的对数作图，用】DBS公司的XLFit3ver3.0.5软件进行

DoseResponseOneSite类别下的四参数Logistic数学模型拟合结果见Fig2.4，其曲线

符合四参数Logistic公式，公式如下:

B一A

y=A+其中y为抑制率(%)，x为药物剂量对数坐标，单位

1+(xlC)^D

，Ate,B=100,

mg-kg-C=133.5,1=-1.981,r2=0.9998.

+Observed

—Predicted

Fig2.4LogisticMathmaticalModelchartofBanlangenbyInhibitPercentageofDHBV

DNAtodosagewhenadministratedfor10days,x:LogarithmicCoordinatesofDosage

(mg-kg-t),y:InhibitingPercentage(%)

4讨论

4.1关于模型

鸭乙型肝炎病毒(DuckhepatitisBvirus,DHBV),属嗜肝DNA病毒科，禽

嗜肝DNA病毒属，与人类乙型肝炎病毒类似，被广泛用于研究嗜肝DNA病毒的

复制机制。其病毒颗粒经卵垂直传播，所以以雏鸭感染率最高。

中国药科大学硕}:学位论文种苦豆r-类生物碱抗乙型肝炎m毒作用及其机理初探

实验感染雏鸭的途径很多，静脉、腹腔、肌肉、皮下和肝内汁射1-3日龄雏

鸭均可使之感染。但根据我们实验观察，选1日龄鸭腿胫静脉注射能够成功复制鸭

的乙型肝炎病毒模型，而日_模型比较稳定。本实验采J日这种方法感染，感染后一周

实验鸭全部为阳性。拉米夫定50mgkglL:1服一大2次共10人对病毒感染鸭血洁

DHBV-DNA抑制效果非常显著，文献报道与此一致。

4.2反跳现象

本实验观察到，三种苦豆子碱中100mgkg-’的苦参总碱和50mgkg-l的氧化

苦参碱的抑制作用较显著，但前者反跳较严重，氧化苦参碱未见反跳，文献报道与

之一致[51

反跳的机制目前尚未完全搞清楚，病毒复制的主要来源有以下几方面:①肝细

胞中主要以超螺旋DNA形式存在的病毒。在慢性乙型肝炎的抗病毒治疗中，不能

彻底清除肝细胞核内的共价闭环DNA是阻碍获得持久的病毒清除疗效的重要因素

之一”‘。②外周血单个核淋巴细胞(PBMC)中存在病毒颗粒。感染PBMC的HBV

可能通过减少细胞因子和抗体的产生，逃避免疫清除2-‘4)③肝、肾、脾、胰等组

织中存留的病毒。

本实验可能由于给药剂量较小，时间较短，对肝内cccDNA和肝外病毒清除不

彻底，从而使得停药后病毒迅速繁殖，出现反跳现象，具体原因有待于进一步研究。

4.3结果解释

实验结果显示三种碱对DHBVDNA的抑制率均有时效关系，以给药10天抑

制效果最好，苦参总碱在给药10天随剂量的增加作用也增加，提示苦参总碱和氧

化苦参碱对鸭血清的DHBV有清除作用，其抑制机制有可能在HBVDNA水平，

有必要进行进一步的实验，观察其对HBVDNA的作用。由于苦参总碱中大部分为

氧化苦参碱，所以氧化苦参碱值得更进一步研究。

有关DHBV感染鸭的肝组织病理学的国内外报道存在较大差异，许多研究认

为病毒血症的动态与其肝组织病理变化不相关，而且也未发现DHBV感染可发展

为肝硬化和肝癌的确切证据，所以本实验没有选感染鸭的肝脏病理结果为依据。

5小结

5.1在本研究所用剂量范围内50-100mgkg’苦参总碱和50mgkg-’的氧化苦参碱

给药10天对DHBVDNA的抑制效果较显著，后者反跳较小。

5.2综合比较对DHBVDNA的抑制效果: