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第53讲动物细胞工程

课程标准解读

知识网络概览

【课标要求】

1.阐明动物细胞培养的条件和过程。

2.阐明动物细胞核移植的原理和过程。

3.阐明动物细胞融合的概念。

4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。

5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。

【能力要求】

理解能力:通过引导学生利用已有的知识经验,理解每项工程技术的关键和核心,并建立基本流程模型。

考点一动物细胞培养

【精梳攻教材】

1.动物细胞培养:

(1)动物细胞培养的含义:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。

(2)动物细胞培养的条件:

(3)动物细胞培养的过程:

①体外培养的动物细胞的类型。

Ⅰ类:细胞能够悬浮在培养液中生长增殖。

Ⅱ类:需要贴附于某些基质表面才能生长繁殖,而且还会发生接触抑制现象,从而使细胞停止分裂增殖。

②动物细胞培养的相关概念。

a.细胞贴壁:体外培养的大多数动物细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。

b.接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖。

c.原代培养:分瓶之前的细胞培养,即动物组织经处理后的初次培养。

d.传代培养:分瓶后的细胞培养。

【名师点睛】

细胞培养三点提醒

(1)并非所有细胞都具有接触抑制的特点,如癌细胞。

(2)细胞在原代培养时为了防止污染,会在培养基中添加抗生素。

(3)实验过程中,胰蛋白酶处理的时间既不能过长,也不能过短。因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质,长时间作用还会分解膜蛋白等,所以处理时间过长对细胞造成损伤,处理时间过短不能使细胞分散。

2.干细胞培养及其应用:

(1)干细胞的含义:具有自我更新和分化潜能的细胞,与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关。

(2)干细胞的种类及应用:

种类

胚胎干细胞

成体干细胞

诱导多能

干细胞

来源

早期胚胎

骨髓、脐带血等

体细胞(如成纤维细胞等)

特点

具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能

具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力

能诱导分化成类似胚胎干细胞的细胞

应用

分化成心肌细胞、神经元和造血干细胞等

造血干细胞用于治疗白血病,神经干细胞用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病等

治疗镰状细胞贫血、阿尔茨海默病、心血管疾病等

【自测强化】

1.辨易错

(1)进行动物细胞培养时,血清应经过高温处理后加入培养基。 (×)

分析:高温会使血清含有的促进细胞生长和增殖的营养物质失活,而使培养的动物细胞生长缓慢等。

(2)贴壁细胞出现接触抑制时,用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞,然后用离心法收集。 (√)

(3)及时更换培养液既可以保证营养物质的供应,又可以清除代谢产物。 (√)

(4)应对接触抑制现象的方法是分瓶培养。 (√)

(5)iPS细胞目前只能由成纤维细胞转化而来。(×)

分析:iPS细胞最初由成纤维细胞转化而来,后来发现已经分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。

2.练表达

(1)(选择性必修3P44旁栏分析)进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞,不能用胃蛋白酶的原因是:胃蛋白酶作用的适宜pH为1.5左右,而动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性。

(2)(选择性必修3P46相关信息)iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞,原因是诱导产生iPS细胞无须破坏胚胎,而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,不会产生免疫排斥反应。

【精练提能力】

1.体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件,培养方式可分为悬浮培养和贴壁培养。下列叙述正确的是 ()

A.悬浮培养一般使用液体培养基

B.贴壁培养一般使用固体培养基

C.悬浮培养会发生接触抑制现象

D.血液中淋巴细胞适合贴壁培养

【解析】选A。动物细胞培养均采用液体培养基,A正确,B错误;贴壁培养会发生接触抑制现象,悬浮培养不会发生接触抑制现象,C错误;体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件,因此血液中淋巴细胞适合悬浮培养,D错误。

2.(2025·山东师范大学附属中学模拟)单倍体胚胎干细胞(haESCs)取自孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞,具有极大的应用前景。下列叙述正确的是 ()

A.培养液中通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清

B.细胞培养应在CO2培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞呼吸

C.haESCs通常不含等位基因,有利于研究隐性基因的功能

D.haESCs可取自孤雌或孤雄发育至囊胚中任何一个细胞

【解析】选C。动物细胞不能直接吸收蔗糖,因此动物细胞培养液中通常含有的糖类是