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实验七人工诱发多倍体植物

一、实验目的与要求

了解人工诱发植物多倍体的原理、方法及其在植物育种上的作用；，观察植物多倍体的

特点，鉴别植物染色体数目的变化及引起植物其他器官的变异情况。

二、实验类型

本实验为验证型实验。

三、实验原理及说明

多倍体的诱发作用是由于药物抑制了纺缍丝的形成，使每个染色体纵裂为二以后，不能

向二极分开，同时细胞也不能分裂成二个细胞，这样每个细胞染色体增加了一倍，便形成多

倍体细胞。人工诱导多倍体通常采用化学方式。

常用的化学诱变剂是秋水仙素，其作用机制是破坏纺锤丝，使细胞停留在分裂中期，阻

碍了复制的染色体向两极移动，从而产生倍性增加的细胞。秋水仙素是在百合科植物秋种红

番红——秋水仙的（Colchicumautumnale）的种子及器官中提炼出来的一种生物碱。化学分

子式是CHON,具有麻醉作用，对植物种子、幼芽、花蕾、花粉、嫩枝可产生诱变作用。

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秋水仙素为白色粉末，易溶于冷水、乙醇、甲醛中，有剧毒，使用时要特别注意，切勿使药

物进入眼中或口中。它的主要作用是抑制细胞分裂释纺锤丝的形成，使染色体不能向两极移

动，细胞分裂被阻止在分裂中期，这样的细胞不能继续分裂，就形成多倍性组织，由多倍性

组织分化产生性细胞，所产生的配子是多倍性的，因而也可通过有性繁殖方法把多倍体繁殖

下去。

多倍体已成功的应用于植物育种，用人工方法诱导多倍体，可以得到一般二倍体所没有

的优良经济性状，如粒大、穗长、抗病性强等。三倍体西瓜、三倍体甜菜、八倍体小黑麦已

在生产上应有。

四、实验仪器

序号仪器台数

1显微镜20

2培养箱1

3恒温水浴1

五、实验内容和步骤

1.材料准备

元葱（2n=16）,黑小麦（2n=14）,蚕豆（2n=12）。

显微镜，载玻片，盖片，镊子，解剖针，恒温水浴（60℃），刀片，滴管，吸水纸，小

试管，黑纸等。

试剂：Schiff试剂，漂洗液，蒸馏水，1NHCL，0.02%或0.05%的秋水仙素，45%醋酸。

Schiff试剂是Feulgan反应的染色剂，配方如下：溶解0.5g碱性品红洁净于100ml蒸馏

水中，搅动使其溶解，冷却至58℃，过滤一棕色试剂瓶中，待滤液冷却至26℃加10ml1NHCL

和0.5g偏重亚硫酸（氢）钾（钠）。振摇使其溶解，密封瓶口，置于黑暗或低温处，12-24h

后检查，如果染色液透明无色或呈淡茶色即可使用；如仍有不同程度的红色未褪去，则可加

入0.5g活性炭，不断振摇，在低温（4℃）下静止过夜，过滤后即可使用。

2.实验方法和步骤

（1）诱导多倍体

将种子浸泡，吸足水，在25℃左右温度下使之萌芽。稍露胚根后取出，用吸水纸吸去

附在材料上的水分，放在培养皿中，用0.1-0.25%秋水仙素20-25℃培养24-28h，或采用间

断处理法，白天浸在药液中，夜间浸在清水中。药剂处理后用清水洗净，插入苗床或花盆中。

对长大的植株或木本植物的顶芽、生长点，可用滴管将0.1-0.2%秋水仙素溶液滴在生

长点上，一日1-2次，连续几天，或用脱脂棉沾上药水，贴附在生长点上，使之徐徐渗入，

也可用0.1-1%的秋水仙素羊毛脂软膏涂在生长点上。

为诱导元葱根尖形成多倍体细胞，可将洋葱剪去老根，置于盛满清水的瓶口上，使下半

部浸入清水中，待长出新根0.5-1.0cm，在移到盛有0.02%的秋水仙素溶液中浸24-48h，根

尖膨大后再用水洗净根尖，在上午分裂高峰时间剪下根尖固定。

（2）鉴定多倍体

直接鉴定：将培养的多倍体根尖用Carnoy固定液固定3-5h，以后保存在70%乙醇中，

采用醋酸洋红或苏木精或Feulgen染色法染色，然后在镜下寻找中期分裂相，检查染色体数。

Feulgen染色：

①水解：去固定材料首先用水冲洗干净，然后用1NHCL室温下冲洗，再放入预热60℃

的1NHCL水解（小麦