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- 2026-02-26 发布于浙江
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第一部分专题八
生物技术与工程;
■内容索引;
热点1PCR引物归类分析;
真题引领
1.引物的设计
(1)(2020·山东,25节选)通过PCR技术可在总cDNA中专一性地扩增出Wx基因的cDNA,原因是引物是根据Wx基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与Wx基因的cDNA特异性结合)。
(2)(经典高考题)设计引物时需要避免引物之间发生碱基互补配对,而造成引物自连。同理也要避免引物之间的互补。复性温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同且G、C含量高的引物需要设定更高的复性温度。;
(1)PCR技术中,提高复性的温度能有效减少反应非特异条带的产生
(2021·湖北,16)(√
(2)科学设计引物是PCR能否成功的关键,若引物的碱基过多或引物的G、C含量过高,会造成PCR的效率偏低,收获的目的基因较少,原因是引物与模板链结合过于紧密,变性时引物不易与模板链脱离(影响变性)。若对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,结果发现有两个或多个条带,从引物角度分析,原因可能是引物过短导致引物的特异性下降
O;
(1)PCR引物的设计原则
①引物长度要适宜,一般引物的长度为15~23bp。过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于TaqDNA聚合酶进行反应;引物过短特异性差,可导致引物与模板链随机结
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