微生物的选择培养与计数 —— 高考生物一轮总复习.docxVIP

微生物的选择培养与计数

1.选择培养基与鉴别培养基

在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。

(1)筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基应以________为唯一的氮源。

(2)将培养基放在高温环境中培养，可分离出________的微生物。

(3)缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中________的微生物。

(4)含青霉素的培养基可淘汰________，筛选出真菌。

(5)无有机碳源的培养基可筛选出________(填“自养”或“异养”)型微生物。

提示(1)尿素(2)耐高温(3)N2(4)细菌(5)自养

2.稀释涂布平板法

稀释涂布平板法常用于微生物的分离和计数，主要包括系列梯度稀释和涂布平板两个操作步骤。

(1)系列梯度稀释操作：将1mL菌液上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释，请标出下图中各稀释液的稀释倍数。

(2)涂布平板操作：主要包括以下4个操作步骤，正确的操作顺序是________。

提示(1)101102103104105106(2)Ⅱ→Ⅳ→Ⅰ→Ⅲ

3.微生物的数量测定——显微镜直接计数法

请回答下列有关显微镜计数法的问题：

(1)若以图1一个中方格中的酵母菌数代表整个计数室中每个中方格中酵母菌数量的平均值，则1mL该稀释菌液中含有的酵母菌数量约为________个。

(2)科研人员用图2所示的血细胞计数板计数，菌液稀释10倍，检测四角上方格(如阴影所示)中的该细菌数量分别为12、16、14、18，估算原菌液中该细菌的密度约为________个/mL。

(3)显微镜直接计数法通常会使计数结果偏大，原因是_____________________

________________。可通过一定的辅助处理，实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液染色，然后通过统计________(填“无色”或“蓝色”)细胞的个数来对活菌计数。

提示(1)6×106(2)2.4×107(3)不能区别死细胞与活细胞，将死细胞和活细胞一并计数无色

4.微生物的数量测定——活菌计数法(稀释涂布平板法)

下图为某同学利用稀释涂布平板法测量某土样中活菌数量的示意图，据图回答问题：

(1)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的__________________________________________________________，

通过统计平板上的________数，就能推测出样品中大约有多少活菌。

(2)为了保证结果准确，一般选择菌落数为____________的平板进行计数。通过对图示三个培养基计数，计算出10g土样中的活菌数为____________个。

(3)用此种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目________(填“高”或“低”)，原因是_____________________________________________________

___________________________________________________________________。

提示(1)一个活菌菌落(2)30～3001.1×109

(3)低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

5.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

为调查某地土质状况，某科研小组对该地土壤中分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。请回答下列问题：

(1)尿素分解菌能分解尿素，而其他微生物不能，其根本原因是_______________。

(2)为确保实验过程中有无杂菌污染，需设置对照，对照组应选用___________________________________________________________________

(填“以尿素为唯一氮源的选择”或“牛肉膏蛋白胨”)培养基，应接种________________(填“等量稀释液”或“等量无菌水”)。

(3)为确保所用的培养基具有选择作用，需设置对照组，对照组应选用________________(填“以尿素为唯一氮源的选择”或“牛肉膏蛋白胨”)培养基，应接种________________(填“等量稀释液”或“等量无菌水”)。

(4)该科研小组从同一选择培养基中挑选出A、B、C三种菌落进行梯度稀释并分别涂布接种在分离尿素分解菌的选择培养基上。经适宜培养后，能检测到A、B两种菌落，却始终检测不到C种菌落。

①由此可得出的结论是：_____________________________________________

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