微生物的培养技术与应用 —— 高考生物一轮总复习.docxVIP

微生物的基本培养技术

1.培养基的配置

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出的供其生长繁殖的营养物质。下表是某种培养基的配方，请据表回答问题。

组分

牛肉膏

蛋白胨

NaCl

H2O

含量

5g

10g

5g

定容至1000mL

(1)图示培养基按物理性质应属________培养基，判断的依据是_____________。

(2)一般来说，培养基中的营养成分主要包括______________________等，其中牛肉膏和蛋白胨主要是为微生物提供________________等。

(3)在培养霉菌时，一般需要将培养基pH调至________；在培养细菌时，一般需要将培养基pH调至________________。

提示(1)液体上述培养基的配方中不含凝固剂琼脂(2)碳源、氮源、无机盐和水碳源和氮源(3)酸性中性或弱碱性

思维升华(1)培养基的类型及用途

(2)培养基的“个性定制”

培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；培养霉菌时，需要将培养基调至酸性；培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性；培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。

2.无菌技术

获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术主要包括消毒和灭菌。

(1)请完善下图灭菌与消毒的比较

(2)无菌技术的主要方法及适用对象(连一连)

思维升华生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。

3.微生物的纯培养

在微生物学中，将由单一个体繁殖所获得的微生物群体统称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。研究者欲对酵母菌进行纯培养，培养基组分如下表，请回答下列有关问题：

组分

马铃薯

葡萄糖

琼脂

H2O

含量

200g

20g

20g

定容至1000mL

(1)配置培养基：配置上述培养基的正确操作顺序为____________。

①称取去皮的马铃薯200g②纱布过滤

③加20g琼脂④加水1000mL、加热煮沸

⑤加20g葡萄糖⑥用蒸馏水定容至1000mL

(2)灭菌：对配置的上述培养基，常使用________________法；对实验所用的培养皿进行灭菌，常使用____________法。

(3)倒平板：待培养基冷却至________℃左右时，在____________附近倒平板。平板冷凝后，要将平板倒置，原因是_____________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________。

(4)接种和分离：通过________在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到________，这种接种和分离方法称为____________法。

(5)培养酵母菌：将接种后的平板(Ⅰ)和一个________的平板(Ⅱ)倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24～48h。

(6)结果分析与评价：若平板Ⅱ表面________(填“有”或“没有”)菌落生长，平板Ⅰ上的单菌落颜色、形状和大小________(填“一致”或“不一致”)，则可初步确定平板Ⅰ上生长的单菌落即为纯化的酵母菌。

提示(1)①④②⑤③⑥(2)湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)干热灭菌(3)50酒精灯火焰平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒置，既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染(4)接种环单菌落平板划线(5)未接种(6)没有一致

4.平板划线法

平板划线法是一种常用的分离微生物的方法。请回答下列问题：

(1)平板划线的正确操作顺序为______________________。

①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红

②将试管口通过火焰

③将平板倒置，放入培养箱中培养

④在火焰附近将培养皿打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖

⑤在火焰旁冷却接种环。同时，拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞

⑥在火焰附近用接种环蘸取一环菌液

⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线

⑧将试管口通过火焰，并塞上棉塞

(2)灼烧接种环之后，要等其冷却后才能伸入菌液，目的是________________。

(3)第一次划线前灼烧接种环的目的是为了______________________________

_______________________