福林酚法检测多肽含量资料.pdfVIP

估计你的福林酚浓度存在问题，导致显色反应不充分。建议在检测前标定你的福林酚。

方法：取福林酚（相当于一元酸）1.0ml，精密移取，加水100ml，加酚酞指示剂数滴，用

0.1mol/LNaOH滴定，按滴定体积对福林酚浓度进行换算。

药典方法配制的浓度为2.0mol/L。

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冻干制剂以甘露醇做骨架测多肽含量，制剂用同浓度甘露醇液做空白测吸光度后，按原方法

标准曲线计算即可。/read.php?tid=94272

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Folin—酚试剂法（Lowry法）

一）实验原理

这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙

的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理

与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而

提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：•在碱性条件下，蛋白

质中的肽键与铜结合生成复合物。Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪

氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深兰色（钼兰和钨兰的混合物）。在一定的条件下，兰色深

度与蛋白的量成正比。

Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化