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实验室生物安全手册

前言：生物安全不是“制度教条”，是你的“保命底线”

深夜实验室里，小李急着赶数据，移液时没注意手套破了个洞

——菌液渗进指缝的瞬间，他没当回事。三天后发热、腹泻，确诊

沙门氏菌感染。这不是虚构的剧情，是真实发生过的实验室感染案

例。

生物安全从不是“小题大做”，而是用制度和习惯，把“看不见

的风险”挡在身体之外。这本手册没有堆砌术语，只讲“你用得到的

规则”“能保命的细节”——毕竟，保护自己，才是做实验的前提。

一、先搞懂：生物安全的核心，是“不让微生物越‘

狱’”

生物安全的本质，就两句话：别让有害微生物碰到你，别让它

们跑到实验室外。

实验室里的“危险分子”分四类：致病细菌（如结核杆菌、沙门

氏菌）、病毒（如乙肝、HIV）、真菌（如白色念珠菌）、重组

DNA/转基因生物。它们的危险程度不同，于是有了生物安全等级

（BSL）的划分——

BSL-1：基本安全，处理不会让健康人致病的微生物（如大

肠杆菌K12）。实验室无需特殊装修，做好清洁即可。

BSL-2：中等风险，处理能引起人类疾病但传播途径有限的

微生物（如乙肝病毒、金黄色葡萄球菌）。需设缓冲区、生物安

全柜，操作人员戴手套/实验服。

BSL-3：高风险，处理能通过呼吸道传播、引起严重疾病的

微生物（如结核杆菌、SARS病毒）。实验室需负压、气闸室，

操作人员穿连体防护服。

BSL-4：极高风险，处理能致命且无疫苗/治疗方法的微生物

（如埃博拉病毒）。全封闭实验室，操作人员穿正压防护服，物

品双重灭菌。

先对应你实验室的等级——这是选对防护措施的第一步。

二、硬件要“靠谱”：实验室的“物理防线”，不能有

漏洞

硬件是生物安全的“铠甲”，比如生物安全柜、高压灭菌器、通

风系统，这些东西出问题，比操作失误更危险。

1.生物安全柜：你的“无菌保护伞”

生物安全柜不是“高级超净台”——它的作用是把实验产生的气

溶胶锁在柜内。用的时候记好“五要”：

要提前5分钟开机，让气流稳定（风速保持0.38-0.5m/s，定

期用风速仪测）；

要缓慢进出手臂，别快速移动破坏气流；

要留空隙——柜内物品不超过1/3，避免挡住HEPA过滤器

（高效过滤器）；

要用后关窗运行10分钟，再用75%酒精擦台面/内壁；

要每年校准——请专业机构测HEPA过滤器的完整性（漏了

等于“伞破了洞”）。

2.高压灭菌器：污染物的“死刑执行器”

实验室所有污染物（菌液、培养皿、手套），必须高压灭菌才

能处理——这是杀死芽孢的唯一方法。用的时候注意：

灭菌前装袋要松：耐高温袋别装太满，留膨胀空间；

参数要准：121℃、30分钟（固体延长到45分钟）；

降压再开门：压力降到0才能开，不然热气喷溅会烫伤；

每周做生物监测：用嗜热脂肪芽孢杆菌菌片测试——灭菌后

菌片不长菌，才说明有效。

3.个人防护装备（PPE）：最后一道“皮肤屏障”

PPE不是“随便穿穿”，要按风险选：

手套：用无粉乳胶/丁腈手套（别用聚乙烯，不防渗透），

戴前吹气检查破洞；操作中沾了菌液，立即换。

防护服：BSL-2用一次性防水款，BSL-3用连体带帽款；穿

时扎紧领口/袖口，避免皮肤暴露。

护目镜：选密封型（别用普通眼镜），防止菌液溅进眼睛。

口罩：处理呼吸道微生物（如结核）戴N95，普通实验用外

科口罩——但要戴严，别露鼻子。

三、操作要“规矩”：每一次“小动作”，都藏着安全

密码

90%的实验室感染，来自“小疏忽”——比如移液没盖盖子、用

污染手摸脸、没消毒台面。

1.样本处理：别让“气溶胶”变成“隐形杀手”

气溶胶是微生物的“飞行坐骑”（比如振荡、离心产生的微小颗

粒），要把它们“锁”住：

移液不用嘴！用移液器，移液管贴容器壁慢吸慢放；