多克隆抗体制备专家讲座.pptxVIP

多克隆抗体制备第1页

多克隆抗体制备方法动物选择动物免疫血清采集抗体纯化第2页

动物选择一、选择制备多克隆抗体(抗血清)动物种类应考虑关键点:需要制备抗血清质量;供给蛋白质抗原动物与免疫动物之间种系关系;免疫动物产生抗体特征（针对不一样性质免疫原选取对应动物）。二、动物年纪、性别和数量反抗体制备影响优先选取青壮年动物；雌性动物免疫应答情况,不论是细胞性还是体液性免疫都比雄性个体强烈。第3页

家兔家兔是最适合制备抗体动物。其体型适中,成年体重为2～6kg,一次采血量可达25～50ml,全放血量则达100～180ml;性格驯顺,易于操作和采血;寿命相对较长,为5～8年;能生产足够量高效价和高亲和力抗血清；通常适合用于制备抗啮齿类和人蛋白质抗体；家兔仅一型IgG而无亚型。用家兔IgG很轻易制备Fc、Fab和F(ab′)2等片段第4页

鸡鸡种系距哺乳动物较远,用以制备抗哺乳动物蛋白质抗体含有独特优点。鸡IgG常称IgY,其特点是不会激活哺乳动物补体成份C1,也不会与细菌蛋白A或蛋白质G、哺乳动物Fc受体或类风湿因子等发生反应。在极端条件下,鸡IgY稳定性不如家兔IgG,不过,鸡IgY在鸡蛋内可保持稳定达数月之久,纯品IgY在中性缓冲液和冷藏条件下则可保留多年之久。用鸡IgY已经制备出Fc和单价Fab或Fab′等片段。鸡可将大量IgY输送入鸡蛋黄中,从鸡蛋中收获抗体可防止采取损伤性搜集伎俩