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基因工程自测题及答案详解

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下关于限制性核酸内切酶的描述，错误的是（）

A.大多数识别6个核苷酸的回文序列

B.EcoRⅠ切割后产生粘性末端

C.同裂酶的识别序列和切割位点完全相同

D.星活性是指酶在非标准条件下特异性降低的现象

答案：C

详解：同裂酶（Isoschizomers）指识别相同序列但切割位点可能不同的限制性内切酶，例如SmaⅠ（切割CCCGGG的中间G）和XmaⅠ（切割CCCGGG的第一个G后）。因此C选项错误。回文序列是多数限制酶的识别特征（A正确）；EcoRⅠ切割GAATTC产生5突出的粘性末端（B正确）；星活性由反应条件改变（如高甘油浓度、Mn2+替代Mg2+）引起，导致酶特异性下降（D正确）。

2.构建cDNA文库时，关键步骤不包括（）

A.提取总RNA

B.逆转录合成cDNA第一链

C.用RNaseH降解mRNA-DNA杂交链中的mRNA

D.连接到基因组DNA载体中

答案：D

详解：cDNA文库以mRNA为模板构建，需提取总RNA并分离mRNA（A是前提），通过逆转录合成cDNA第一链（B正确），RNaseH可部分降解mRNA形成小片段作为引物，用于合成cDNA第二链（C正确）。cDNA文库应连接到适合表达的载体（如质粒或λ噬菌体）