细胞分离技术课件.pptVIP

*高壓勻漿法適用的範圍—大規模細胞破碎的常用方法☆高壓勻漿法適用的範圍：酵母和大多數細菌細胞的破碎；料液細胞濃度可以很高，20%左右。☆不宜使用高壓勻漿法。易造成堵塞的團狀或絲狀真菌，較小的革蘭氏陽性菌，含有包含體的基因工程菌（因包含體堅硬，易損傷勻漿閥）*升高壓力有利於破碎，減少細胞的迴圈次數，甚至一次通過勻漿閥就可達到幾乎完全的破碎，這樣就可避免細胞碎片不至過小。但p大到一定值時對勻漿器的磨損增加，也有實驗表明p超過一定值時，R增加但很慢。在工業生產中，通常採用的壓力為55－70Mpa。破碎性能還隨菌體種類和生長環境的不同而不同大腸桿菌的細胞比酵母細胞容易破碎，生長在簡單的合成培養基上的大腸桿菌比生長在複雜培養基上容易破碎。影響高壓勻漿器細胞破碎因素*高壓勻漿法X-擠壓器改進的高壓方法：將濃縮的菌體懸液冷卻至-25℃至-30℃形成冰晶體，利用500MPa以上的高壓衝擊，冷凍細胞從高壓閥小孔中擠出。細胞破碎是由於冰晶體在受壓時的相變，包埋在冰中的細胞變形所引起的。主要用於實驗室中。優點是適用的範圍廣，破碎率高，細胞碎片的粉碎程度低以及活性的保留率高對冷凍-融解敏感的生化物質不適用。*2）珠磨法珠磨是常用的方法細胞懸浮液與極細的玻璃小珠、石英砂、氧化鋁等研磨劑（直徑小於1mm）一起快速攪拌或研磨，研磨劑、珠子與細胞之間的互