【2026年整理】凝胶层析法分离纯化蛋白质.pptVIP

凝胶层析法分离纯化蛋白质;【目的】;【原理】;凝胶层析是按照蛋白质分子量大小进行分离的技术，又称之凝胶过滤、分子筛层析或排阻层析。

单个凝胶珠本身象“筛子”。不同类型凝胶的筛孔的大小不同。;带网孔的葡聚糖珠;凝胶过滤层析过程示意图;总结：

相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔被完全排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间向下流动，因此流程较短，移动速度快；所以首先流出。

相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔，可完全渗透进入凝胶颗粒的网孔，在向下移动过程中，因此流程较长，移动速率慢；所以最后流出。

中等大小的分子，它们在凝胶颗粒内外部分渗透，渗透的程度取决于它们分子的大小，所以它们流出的时间介于二者之间，这样分子大的组分先流出，分子小的组分后流出。这样样品经过凝胶层析后，各个组分便按分子从大到小的顺序依次流出，从而达到了分离的目的。;【实验器材】;楷土戮港际硝唱弓畅励洛疽痴伞巳砷倪蛇帕玛漠悸每秧这谢等侈蔚滚顺增凝胶层析法分离纯化蛋白质凝胶层析法分离纯化蛋白质;;;;【实验试剂】;【操作方法】;二、装柱

关闭出口，向柱内加入洗脱液约1cm高，将浓浆状的凝胶缓慢地倾入柱中，使之自然沉降，凝胶沉降约1㎝高度后打开出水口，继续加入凝胶浆，直到凝胶沉积至一定高度即可。装柱要求连续，均与，无气泡，无“纹路”。;三、平衡

将洗脱液