外周血染色体核型分析培训课件.pptVIP

背景知识（Backgroundinformation);背景知识(Cont.);简介(Introduction);染色体核型技术检测（遗传病诊断）：

Eg.唐氏综合症(21-3体)，Patau综合症(18-3体)，Edwards综合症(13-3体)。;染色体核型技术检测（产前婚前孕前诊断）：

Eg.猫叫综合症（5P综合症),特纳综合症，先天性睾丸发育不良综合症，超雄综合症(XYY综合症)，超雌综合症(XXY综合症)。

;项目介绍(Project)

-外周血染色体核型分析;外周血中淋巴细胞在含有植物血凝素(PHA)的培养基中培养68-72小时，进入生长旺盛的有丝分裂期；

之后加入秋水仙素抑制纺锤体形成，使其停留在细胞分裂中期；

再经过氯化钾溶液低渗、固定、滴片制片、胰酶消化、姬姆萨染色，在油镜下可观察到每个分裂期的染色体形态及数量。;1.接种：先在每瓶含有PHA的5ml培养基的培养瓶中接种0.5ml的外周血，接种2瓶。

2.培养：37℃全封闭式培养68-72h。在细胞收获前加入0.1ml浓度为20ug/ml秋水仙素培养1-1.5h。

3.细胞的收获：

1）用离心机以2200转/分钟离心5分钟后弃上清液。

2）加入0.075M的KCl溶液10ml，充分混匀，低渗时间为15-18分钟。

3）预固定：低渗后加入固定液1ml充分混匀（固定