第八章 高效液相色谱法.pptVIP

2）反相离子抑制色谱在反相色谱中，通过加入缓冲溶液调节流动相pH值，抑制组分解离，增加其k和tR，以达到改善分离的目的A、离子抑制剂：弱酸、弱碱性物质、pH一定的缓冲溶液B、k的影响因素：与流动相极性有关，还与pH值有关a、选择流动相：应同时考虑极性及pH值酸性物质：加入酸HAc，tR↑，k↑碱性物质：加入碱NH3·H2O，tR↑，k↑b、调节pH范围：3.0~8.0pH9.0破坏键合相与载体的结合pH3.0腐蚀柱子C、适用：极弱酸碱物质pH=3~7弱酸；pH=7~8弱碱；两性化合物分离度（resolution，R）又称分辨率给定色谱柱对两种溶质分离程度的量度。是指相邻两峰峰顶间距离与两峰基线宽度平均值的比值（衡量色谱分离条件优劣的参数）；涉及色谱过程热力学因素和动力学因素。设色谱峰为正常峰（峰形对称且满足正态分布），且W1?W2=4?若R=0，峰间距?tR=0，两峰完全重合；R=1，?tR=4?，两峰分离度可达98％；R=1.5，?tR=6?，两峰离度可达99.7％；R≥2，?tR≥8?，完全分开。《中国药典》规定R≥1.5可作为两组分分离的指标一、7—5HPLC分离条件的选择习题：在液相色谱中，为了改善分离选择性，有效措