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细菌药敏纸片加样操作规范

1操作前准备

1.1人员资质

操作人员必须经过临床微生物检验专业培训，考核合格后持证上岗，熟悉细菌药敏试验原理、美国临床和实验室标准协会（CLSI）现行版判读标准、生物安全操作规范，掌握药敏纸片加样核心要求，能够识别操作异常并正确处置，未取得资质人员不得独立开展操作。

1.2环境与生物安全准备

操作必须在生物安全二级（BSL-2）实验室的二级生物安全柜内开展，操作前30min开启生物安全柜紫外灯进行环境消毒，消毒完成后开启通风15min，调节柜内温度至18℃~25℃，相对湿度40%~60%，避免湿度过高导致药敏纸片吸潮降解。操作人员进入操作区需穿戴一次性医用乳胶手套、N95口罩、一次性隔离衣，操作过程中严格遵守生物安全操作规程，避免气溶胶污染。

1.3试剂与耗材准备

（1）药敏纸片：选用符合CLSI质量标准的商品化药敏纸片，未开封纸片需保存于-20℃密闭低温冰箱，有效期符合产品说明书要求，最长不超过2年。开封后的药敏纸片需立即转移至带变色硅胶干燥剂的密闭防潮容器中，保存于2℃~8℃冰箱，有效期不超过1个月；容器内硅胶变色后需立即更换，严禁使用吸潮的药敏纸片。取出纸片前需将盛装纸片的容器平衡至室温：未开封的铝箔包装平衡10min~15min，开封后的储存容器平衡2min~5min，避免低温容器表面产生冷凝水打湿纸片。

（2）培养基：纸片扩散法药敏试验常规使