整合点3　“功能强大”的基因工程和蛋白质工程.pptxVIP

整合点3“功能强大”的基因工程

和蛋白质工程;01.知识整合;01.知识整合;1.归纳基因工程的基本工具;

微点拨

若用不同的限制酶切割出不同的黏性末端，则能使目的基因和载体定向连接，避免自身环化和反向连接，提高连接的有效性。;2.理解掌握基因工程的操作步骤

(1)目的基因的筛选与获取;(2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建;微点拨

①启动子和终止子：启动子(DNA片段)≠起始密码子(位于mRNA上)；终止子(DNA片段)≠终止密码子(位于mRNA上)。

②目的基因插入位置：启动子与终止子之间。

③利用乳腺生物反应器生产药物时，应将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起。;(3)将目的基因导入受体细胞;提醒

辨析农杆菌转化法中的“两个两次”

①两次拼接：第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA的中间部位；第二次拼接指插入目的基因的T-DNA被拼接到受体细胞染色体的DNA上。

②两次导入：第一次导入是将含目的基因的Ti质粒重新导入农杆菌；第二次导入是将含目的基因的T-DNA导入受体细胞。;(4)目的基因的检测与鉴定;

微点拨

PCR技术不仅可用于获取和扩增目的基因，还能用于检测受体细胞中是否含有目的基因或受体细胞中的目的基因是否转录出mRNA。;3.图示法解读蛋白质工程;4．DNA的粗提取与鉴定;提醒

DNA的粗提取与鉴定注意事项

(1)实验材料