蜂蜜中蔗糖转化酶的测定 分光光度法.docxVIP

蜂蜜中蔗糖转化酶的测定分光光度法

Determinationofsaccharaseactivityinhoney—Spectrophotometricmethod

1范围

本文件规定了蜂蜜中蔗糖转化酶的分光光度测定方法。

本文件适用于蜂蜜中蔗糖转化酶的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

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3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4方法原理

蜂蜜中所含有的蔗糖转化酶能将底物对硝基苯-a-D-毗喃葡萄糖苷定量转化为对硝基苯酚，通过测定特定波长下吸光度值确定对硝基苯酚含量来测定蜂蜜中蔗糖转化酶。将蜂蜜溶液加入到底物溶液中，混合均匀，在40℃条件下反应20min后，添加终止溶液终止反应，于400nm波长下，测定吸光度，吸光度值与蔗糖转化酶值成正比。同时做空白对照。

5试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为规定的三级水。

5.1磷酸二氢钾(KH?PO?)。

5.2二水合磷酸氢二钠(Na?HPO?·2H?O)。

5.3对硝基苯-α-D-吡