间接法ELISA实验操作详解.pdfVIP

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间接法ELISASOP

一、包被

1．抗原包被量为20µg/板。

2．例如：抗原浓度为0.8mg/ml。

lululul空白对照ulOD值ELISA显色系统配制试验显色A液总体积ml显色缓冲液mlTMBml显色B液总体积ml显色缓冲液ml过氧化脲l此显色溶液放于冰箱中可长期使用显色液显色缓冲液AB混合液配制方法称量下列试剂配制量ml完整版学习资

3．取25µl抗原与20mlCBS（抗原包被液）混匀，100µl/孔。

4．包被完毕后，4℃过夜。

二、封闭

1．从4℃冰箱中取出酶标板，甩干包被液，拍板。

2．加封闭液，200µl/孔。

3．37℃孵育2h。

4．甩干，洗板（3次）。

5．用干燥的自封袋4℃保存。

【注】：洗板，将孔内液体甩出，每孔加200µl-300µl洗板液，静置2min，甩出，将板拍在干的纱

布上，将孔内液体拍干为佳。

三、一抗

1．可洗板一次。

2．阳性对照：1µl阳性血清加入1ml抗原稀释液中，做1：1000稀释（第一孔）。

配制方法lHOldHO注显色