（共15页PPT）第21讲第四章第一节基因芯片技术.pptVIP

第四章基因工程在基因功能研究中的应用湖南师范大学生命科学学院袁婺洲

本章目录4.1基因表达谱研究技术4.2基因突变研究技术4.3基因敲除与基因敲减技术4.4基因过表达与异位表达技术4.5基因相互作用研究技术

第一节、基因表达谱研究技术胚胎原位杂交技术胚胎抗体染色技术基因芯片技术蛋白质组学技术

三、基因芯片技术将cDNA或RNA以点的形式结合在尼龙膜,玻片或塑料片上,形成距阵排列,与同位素或荧光标记的探针杂交,通过放射自显影或荧光扫描仪检测杂交信号.

1、基因芯片技术原理

2、基因芯片发展历程SouthernNorthernBlotDotBlotMicroarray样品电泳分离，探针标记探针的集合体固定于芯片上，样品的集合体进行标记1991年，Affymetrix公司第一块寡核苷酸芯片

3、基因芯片类型cDNA(CDA):用微量点样技术制作的cDNA芯片.中等密度,约10000个点阵;片段长度500-5000bp;用于比较分析.Oligo(ODA):片上就位合成寡核阵芯片。高密度,约40万个点阵.片段大小小于25个核.用于测序,检验点突变.

4、芯片的组成成分

光蚀刻原位合成的寡核苷酸芯片

高密度的点阵技术1个平方厘米的面积至少可排列几十万到一百多万个探针合成区（“点”）

5、GeneChip?的操作流程LLL标记的