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TCR-T细胞筛选服务规范

一、靶抗原筛选标准与验证流程

靶抗原的选择是TCR-T细胞筛选服务的首要环节，需满足特异性、免疫原性及临床安全性的三重要求。理想的靶抗原应具备以下特征：在肿瘤细胞中高表达且在正常组织中低表达或不表达，如HPV相关癌症中的E6/E7蛋白、黑色素瘤中的MART-1抗原；与肿瘤发生发展直接相关，如KRASG12V突变蛋白，以降低抗原丢失导致的治疗失败风险；能够被MHC分子有效呈递，且其肽-MHC复合物（pMHC）具有足够的稳定性以被TCR识别。

抗原筛选需采用多维度验证策略。首先通过转录组测序（RNA-seq）和免疫组化（IHC）分析肿瘤组织与正常组织的抗原表达差异，确保肿瘤特异性。其次利用质谱（MS）技术直接鉴定肿瘤细胞表面HLA结合肽，如对HLA-I类分子进行免疫沉淀后洗脱肽段，通过高分辨率质谱鉴定天然呈递的抗原肽序列。对于新抗原筛选，需结合全外显子测序（WES）与HLA分型数据，利用NetMHC等预测工具评估突变肽的MHC结合亲和力，优先选择亲和力IC50500nM的候选肽段。

临床前安全性验证需重点评估交叉反应风险。采用丙氨酸扫描突变技术分析TCR与pMHC的关键结合位点，并通过BLAST比对正常组织蛋白数据库，排除与自身抗原同源的肽段。例如针对PRAME抗原的TCR筛选中，需验证其与视网膜色素上皮细胞的交叉反应性，避免治疗相关视力损伤。

二、TCR