流动注射化学发光法测定盐酸仑氨西林.doc

【标题】?流动注射化学发光法测定盐酸仑氨西林 【作者】杨英姿 【关键词】?化学发光??鲁米诺-双氧水??仑氨西林??流动注射分析 【指导老师】何树华 【专业】化学教育 【正文】1.引言盐酸仑氨西林（Lenampicillin hydrochloride），为氨苄西林酯，是一种近几年才在我国上市的新药，目前，常用其盐酸盐制剂供口服。仑氨西林在体内水解成氨苄青霉素后，发挥抗菌作用。主要系通过抑制细菌细胞壁的合成而起杀菌作用。盐酸仑氨西林主要适用于对氨苄西林敏感菌所致的下列感染：呼吸道感染,泌尿生殖器感染,腹内感染,皮肤、软组织感染,耳、鼻、喉感染及其它严重感染。目前，测定盐酸仑氨西林的方法只有紫外分光光度法[1]和高效液相色谱法[2-4]。文献[1]报道的紫外分光光度法，线性范围为0.10～0.90ug.L-1(r=0.9998)，此法操作简便，结果准确，但是方法的灵敏度较低。文献[2]报道的，采用高效液相色谱法测定盐酸仑氨西林含量，线性范围为0.10～0.40ug.L-1，此法灵敏度也低，且仪器昂贵、操作繁锁。流动注射化学发光法具有灵敏度高，分析速度快，仪器设备简单，分析成本低等优点[5-15]，近年在药物分析中得到了广泛的应用。本文研究发现，在碱性条件下，过氧化氢氧化鲁米诺产生化学发光，盐酸仑氨西林对该体系的化学发光有显著的增强作用。基于此，结合流动注射技术，建立了测定盐酸仑氨西林的流动注射化学发光分析法。该法的检出限为0.013mg.L-1(IUPAC,3σ)，线性范围为0.05-1.0mg.L-1。对0.80mg.L-1盐酸仑氨西林平行测定11次，其相对标准偏差为4.7%。该方法快速、简便、准确度好、灵敏度高、选择性好，用于盐酸仑氨西林片剂的测定，平均回收率为99.8%(n=11)。2.实验部分2.1仪器和试剂BPCL超微弱化学发光仪（中国科学院生物物理研究所）；惠普Victra 4电脑；HL-2恒流泵（上海青浦沪西仪器厂）。盐酸仑氨西林标准溶液0.20mg.mL-1：准确称取盐酸仑氨西林标准品（中国药品生物制品检定所）10.0mg用二次水溶解，并定容至100mL棕色容量瓶中，保存于冰箱中（4℃）；Luminol储备液（0.01mol/L）：称取1.772g鲁米诺，用0.10mol/L的氢氧化钠溶液溶解并定容至1.0L；1.0mol/L氢氧化钠；双氧水储备液（30%）；所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。2.2实验方法按图1所示流路安装好仪器，开启蠕动泵，将各管道依次通过稀硝酸、二次蒸馏水清洗干净，插到相应的溶液中，开启化学发光分析仪和IFFM分析系统，仪器测量参数负高压设为-400V，增益设为2，蠕动泵流速调为6.0mL.min-1的情况下开始测量，待基线稳定后，将流通阀中的盐酸仑氨西林样品注射到鲁米诺和双氧水的混合溶液中，记录反应的发光强度，以增加的光强定量。?图1?流动注射化学发光测定盐酸仑氨西林示意图Fig.1 Schematic diagram of the flow injection chemiluminescence determination of Lenampicillin hydrochlorideP:?蠕动泵（Peristaltic pump）;V:?六通阀（valve） F:?流通池（flow-cell） D:检测器（detector）3.结果与讨论3.1条件选择3.1.1过氧化氢浓度的影响考察了0~10.0%范围内不同浓度过氧化氢对发光强度的影响，发现当过氧化氢浓度小于8.6%时，发光强度随过氧化氢浓度的增加而增大，超过8.6%时，发光强度反而降低(如图2)。因此在以后的实验中选用过氧化氢的浓度为8.6%。(Lenampicillinhydrochloride0.80ug.mL-1，NaOH?:0.10 mol/L?,Luminol：0.10mmol. L-1，-400V)图2?双氧水浓度对化学发光强度的影响Fig2 Effect of H2O2 concentration on the increase CL intensity3.1.2氢氧化钠浓度的影响鲁米诺只有在碱性条件下才能稳定存在，鲁米诺、过氧化氢化学发光反应要在碱性环境中化学发光信号较明显。本实验考察了0~0.10mol.L-1范围内不同浓度的氢氧化钠对发光强度的影响，发现氢氧化钠的最佳浓度为0.03mol.L-1(如图3)。(Lenampicillin hydrochloride：0.8ug.mL-1，Luminol：0.1mmol. L-1，H2O2：8.6%，?-400V)图3?氢氧化钠浓度对化学发光强度的影响