流动注射化学发光法测定氨基乙酸的研究.doc

【标题】?流动注射化学发光法测定氨基乙酸的研究 【作者】马兴菊 【关键词】 N-溴代琥珀酰亚胺??二氯荧光素??氨基乙酸??流动注射??化学发光 【指导老师】方卢秋 【专业】化学教育 【正文】第一章 前?言第一节??氨基乙酸的应用氨基乙酸又名甘氨酸(Gly)，分子式为：C2H5NO2，结构简式为：NH2-CH2-COOH?(如图1.1)，相对分子质量为：75.07。白色结晶体或结晶体粉末，有特殊甜味；溶于水、吡啶，微溶于无水乙醇，熔点：232-236℃；分解温度：236?℃；比重1.1607[1]，是结构最简单的氨基酸类化合物，是人体非必需的不带电的极性氨基酸[2]。应用非常广泛，是十分重要的有机合成中间体。广泛用于农药、医药、日用化工、食品和饲料添加剂领域，其中80%用于除草剂草甘膦的生产[3]。一、在医药化工中，可用作氨基酸制剂、金霉素的缓冲剂和抗巴金森氏病药物：L-多巴的合成原料，亦可用作合成其它氨基酸，如：苯丙氨酸、苏氨酸、丝氨酸等的原料。二、在食品方面，常作为食品添加剂添加于各种食品中，用于调味、杀菌防腐、抗氧化、营养强化等，便于人体吸收和在体内合成其他必需和非必需的氨基酸，可单独或与谷氨酸等配合用作调味剂，也可用于合成酒及其酿造制品，还可用作奶油、人造奶油和干酪等的添加剂，以延长食品的保质期。氨基乙酸本身清甜美味，能除去食物中令人不悦的口味，由于具有氨基和羧基两性离子，故有很强的缓冲性，对食盐、食醋等的味感能起缓冲作用，减轻对味感的刺激[2，5]。三、在农药工业中，大量用作合成草甘膦、增甘膦等的原料[4]。因此，通过实验研究建立快速、准确、简便的分析方法，具有十分重要的意义。第二节??文献综述氨基乙酸分子中含有-NH2。已有的研究表明：分子中含-NH2，-NH-的物质能被N-溴代丁二酰亚胺氧化产生化学发光现象[6]，结合流动注射分析①技术，可以建立流动注射化学发光分析法。所需实验仪器相对于大型精密仪器分析法，具有设备简单、操作方便、分析速度快、灵敏度高、价格低廉和重复性较好等的特点[7-11]。工业氨基乙酸含量的测定是以冰乙酸为溶剂，结晶紫为指示剂，高氯酸标准溶液为滴定剂，终点颜色是由紫色变为蓝绿色。由于这是个非水溶液滴定，颜色由紫色变成蓝绿色这个变化不太明显，不利于终点观察，导致分析误差偏大，很难达到HG2029—91标准②的要求[1]。氨基乙酸工业品含量的分析有的采用蒸馏法[12]，有的采用甲醛法[12]。蒸馏法是在硫酸钾及硫酸铜存在下，将有机氮转变为无机氮，然后加过量的氢氧化钠溶液，加热使成气态氨蒸馏而出，气态氨用已知浓度的硫酸溶液吸收，过量的硫酸再用氢氧化钠标准溶液回滴，以甲基红为指示剂确定终点，求得氨基乙酸含量。甲醛法是在过量的预先中和的甲醛溶液存在下，氨基乙酸与甲醛形成稳定的甲撑氨基乙酸，析出的甲撑氨基乙酸用氢氧化钠标准溶液滴定，以酚酞作指示剂确定滴定终点，从而求得氨基乙酸含量。不管是蒸馏法还是甲醛法，氨基乙酸主含量结果会偏高，因为，在生产过程中副产品为氯化铵，影响测定结果。目前，测定氨基乙酸的方法有:电位滴定法[13]、交流示波极谱滴定法[14]、高效液相色谱法[15-17]、间接原子吸收光谱法[18]、电泳法[19]、HPCIM与荧光光度法[20]、薄层色谱法[21]等。这些方法使用仪器昂贵不宜普遍使用，或所用试剂对人体有毒害、或因操作繁杂所需时间长，而采用化学发光③法测定氨基乙酸尚未见报道。研究发现，二氯荧光素作为能量转移剂，N-溴代琥珀酰亚胺氧化氨基乙酸产生化学发光，十六烷基三甲基氯化铵对该化学体系具有强烈的增敏作用，据此建立了测定氨基乙酸的流动注射化学发光法。第二章???实验部分第一节??仪器和试剂IFFM-D型流动注射化学发光分析仪(西安瑞迈电子科技有限责任公司)；日立F-4500型荧光分光光度计(日本日立公司)；准确称取0.2526g氨基乙酸固体粉末(上海试剂三厂，生化试剂，含量99.0%)配制25ml 1×10-2g/mL标准储备液；称取20.83g氢氧化钠（重庆东方试剂厂，含量96%），加水溶解定容于500mL容量瓶中，配成1.0 mol/L的储备液；准确称取0.5015g二氯荧光素(上海试剂三厂)溶解于0.1mol/L氢氧化钠溶液配制250mL 5×10-3mol/L的储备液；准确称取1.7778g十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)(南开大学精细化学实验厂，含量90%)配制500mL1×10-2mol/L储备液；N-溴代丁二酰亚胺(NBS)（中国医药(集团)上海化学试剂公司，含量98.5%），准确称取1.8070g，溶解定容于100mL容量瓶中，配成0.10 mol/L的储备液，现配现用，用