热原检查法.pdfVIP

附录Ⅺ D 热原检查法 本法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔 体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。 供试用家兔 供试用的家兔应健康合格，体重1.7kg以上，雌兔应无孕。预 测体温前7日即应用同一饲料饲养, 在此期间内，体重应不减轻，精神、食欲、 排泄等不得有异常现象。未曾用于热原检查的家兔；或供试品判定为符合规定, 但组内升温达0. 6℃的家兔；或3周内未曾使用的家兔，均应在检查供试品前3～ 7日内预测体温，进行挑选。挑选试验的条件与检查供试品时相同，仅不注射药 液，每隔30分钟测量体温1次，共测8次，8次体温均在38. 0 ～39. 6℃的范 围内，且最高与最低体温相差不超过 0. 4℃的家兔，方可供热原检查用。用于 热原检查后的家兔，如供试品判定为符合规定，至少应休息 48 小时方可再供热 原检查用，其中升温达 0. 6℃的家兔应休息 2 周以上。如供试品判定为不符合 规定，则组内全部家兔不再使用。 试验前的准备 在做热原检查前 1～2 日，供试用家兔应尽可能处于同一温 度的环境中，实验室和饲养室的温度相差不得大于3℃，且应控制在17～25℃， 在试验全部过程中，实验室温度变化不得大于3℃，应防止动物骚动并避免噪声 干扰。家兔在试验前至少1小时开始停止给食，并置于宽松适宜的装置中，直至 试验完毕。测量家兔体温应使用精密度为 ±0. 1℃的测温装置。测温探头或肛 温计插入肛门的深度和时间各兔应相同，深度一般约6cm，时间不得少于1分半 钟， 每隔 30 分钟测量体温 1 次，一般测量 2 次，两次体温之差不得超过 0. 2 ℃，以此两次体温的平均值作为该兔的正常体温。 当日使用的家免，正常体温 应在38. 0～39. 6℃的范围内，且同组各兔间正常体温之差不得超过1℃。 与供试品接触的试验用器皿应无菌、无热原。去除热原通常采用干热灭菌 法（250℃、30分钟以上），也可采用其他适宜的方法。 检查法 取适用的家兔3只，测定其正常体温后15分钟以内，自耳静脉缓 缓注入规定剂量并温热至约38℃的供试品溶液，然后每隔30分钟按前法测量其 体温 1 次，共测 6 次，以 6 次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温 的升高温度（℃）。如 3只家兔中有 1只体温升高0.6℃或0.6℃以上，或3只家 兔体温升高的总和达1.3℃或1.3℃以上，应另取5只家兔复试，检查方法同上。 结果判断 在初试的3只家兔中，体温升高均低于0.6℃，并且3只家兔体 温升高总和低于 1.3℃；或在复试的 5 只家兔中，体温升高 0.6℃或 0.6℃以上 的家兔不超过1只，并且初试、复试合并8只家兔的体温升高总和为3.5℃或3.5 ℃以下，均判为供试品的热原检查符合规定。 在初试的 3 只家兔中，体温升高 0. 6℃或 0. 6℃以上的家兔超过 1 只；或 在复试的5只家兔中,体温升高0. 6℃或0. 6℃以上的家兔超过1只；或在初试、 复试合并 8 只家兔的体温升高总和超过 3. 5℃，均判为供试品的热原检查不符 合规定。 当家兔升温为负值时，均以0℃计。