医学论文：hplc法测定辐花中獐牙菜苦苷的含量.docVIP

??????????????????? 作者：张秀桥,黄凤娇,陈家春,刘焱文【摘要】? 目的 建立辐花中獐牙菜苦苷含量测定的方法。方法 用高效液相色谱法,色谱柱为alltimal c18(5 μm, 250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脱,流速1 ml/min,检测波长234 nm,柱温30 。结果獐牙菜苦苷在3.10～30.98 μg范围内线性关系良好,相关系数为0.999 1；平均回收率为98.0%,rsd＝2.66%(n＝6)。结论 该方法操作简便,分离度好,为建立其质量标准提供了实验依据。 【关键词】? 辐花；高效液相色谱法；獐牙菜苦苷；含量测定 ??? abstract：objective to establish a method for content determination of swertiamarin in? lomatogoniopsis alpina. methods hplc method for determination was used. chromatographic column： alltimal c18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm). mobile phase： methanol-water (including 0.05% h3po4), and gradient elution. flow rate：1 ml/min. wavelength：234 nm. column temperture：30 . results the calibration curve of swertiamarin was in good linearity over the range of 3.10～30.98 (r=0.999 1). the average recoveries were 98.0%, with rsd＝2.66% (n＝6). conclusion? it is a simple and sensitive method in controlling the quality of lomatogoniopsis alpina.??? 　　key words：lomatogoniopsis alpina；hplc；swertiamarin；determination???? 辐花来源于龙胆科辐花属植物lomatogoniopsis alpina et ,主要产于西藏东北部、青海南部及四川等地,生于云杉林缘、阴坡草甸及灌丛草甸中。辐花是国务院于1999年8月4日批准的《国家重点保护野生植物名录(第一批)》保护级别为?级的品种之一。为了变野生为家种,为建立其质量标准提供实验依据,本试验用hplc法测定了辐花中獐牙菜苦苷(swertiamarin)的含量。　　1? 仪器与试药??? 　　美国agilent1100高效液相色谱仪(g1311a泵、柱温箱、g1316a紫外检测器、shemstation色谱工作站),sartorius bp211d分析天平。??? 　　药材采自四川省阿坝州金川县俄热,经华中科技大学同济医学院陈家春教授鉴定为龙胆科辐花属植物lomatogoniopsisalpina et 。??? 　　对照品獐牙菜苦苷自提,hplc归一法测定纯度 98%。甲醇为色谱纯,水为重蒸水,均经0.45 μm滤膜滤过。　　2? 方法和结果　　2.1? 色谱条件及系统适应性试验 ??? 色谱柱为alltimal c18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)。流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脱,0～25 min,甲醇由20%增至50%；25～35 min,甲醇由50%增至60%；流速1 ml/min。检测波长234 nm,柱温30 。理论塔板数均 104,对称因子0.95～1.05。色谱图见图1。　　2.2? 供试品溶液的制备　　? 对照品溶液的制备? 　　分别精密称取对照品獐牙菜苦苷一定量,混合后用甲醇超声溶解并定容,制成浓度分别为1.549 mg/ml的溶液,经0.45 μm滤膜滤过,滤液作为对照品溶液。　　? 样品溶液的制备? 　　取辐花全草0.5 kg,置45 烘箱干燥至恒重,粉碎,过80目筛,混合均匀后取约0.25 g,精密称定。用约8 ml甲醇浸泡过夜,超声提取2次,每次30 min,滤过。合并滤液,滤液水浴蒸干后用甲醇定容至10 ml,经0.45 μm滤膜滤过,滤液作为样品溶液。　　2.3? 方法学考察　　? 线性关系考察试验? 　　取上述对照品溶液,分别进样2、4、8、10、12、16、18、20 μl(n＝2),以进样量为横坐标、峰面积为纵坐标进行回归计算,獐牙菜苦苷回归