生物指示剂挑战性实验记录140g.doc

生物指示剂挑战性实验记录 设备名称 臭氧发生系统 规格型号 JZCF-G-3-140g 出厂编号Z14001 安装位置 四楼HVAC机组房间 实验区域 四楼洁净区 HVAC系统编号 JK401 实验日期 报告日期 检验依据：《臭氧发生系统验证》O3-V-VP-01 一、实验器具： 1、生物指示剂： 指示剂名称 枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞菌片 批号 生产厂家 北京四环卫生药械厂 初期菌数 5*105—5*106CFU/片 生产日期 2007年8月2日 有效期至 2008-08-01 2、 序号 仪器设备名称 型号 序号 仪器设备名称 型号 1 培养皿 DN90MM 4 具塞锥形瓶 200ML 2 玻璃试管 --- 5 超净工作台 --- 3 吸管 1ML，10ML 6 恒温培养箱 GH-6000AB 二、实验方法： 1、测试前的准备工作： 1.1将JK401机组新风阀关闭，启动风机运行，设定频率在40HZ； 1.2四楼洁净区卫生已清洁完毕，岗位已在无人状态下，并且洁净区的温度＜24℃，相对湿度＞70%（臭氧消毒所需温湿度条件）； 1.3检查洁净区内应无暴露的物料、中间产品、成品和易被臭氧氧化、腐蚀的橡胶、塑料等制品，应采取防护措施，防止臭氧氧化破坏； 1.4按臭氧发生系统操作规程操作。检查并全开臭氧发生器中的O3出气阀门和冷却水出水阀门，以保证O3气体出气和冷却水排放全部畅通； 1.5检查臭氧发生器的冷却水进水压力和进水温度，应控制进水温度＜35℃，进水压力0.1～0.3MPa，打开HVAC机组和臭氧发生器的冷却水进水控制阀门； 1.6检查臭氧发生单元的“电流调节”按钮，并应使其在最小处（mix），相对应的电流表应显示为0； 1.7接通臭氧发生系统电源，“富氧关”按钮上的红灯指示灯应正确显示（亮），电源电压应正常显示（220V）； 1.8将臭氧发生器的时间设定为3.5H，以免在测试不同杀菌时间与杀菌率关系时，造成自动停机; 1.9在药检中心无菌室内超净工作台上，将枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞菌片放置于无菌培养皿（无培养基）中，每个培养皿放置1片，共放 7 个培养皿（培养皿应预先进行编号，以确定杀菌时间），盖上平皿盖，用牛皮纸包扎好； 2、杀菌实验： 2.1将包扎好的枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞菌片培养皿，通过传递窗传入洁净区，放置在内包间正中央地面上； 2.2全部移开平皿盖（注意防止对培养基平皿污染），人员撤离出洁净区，准备臭氧消毒； 2.3按下绿色“富氧开”启动按钮，“富氧开”绿色按钮指示灯亮，相应的“富氧关”红色按钮指示灯灭，“臭氧关”红色按钮指示灯亮，“时间定时器”通电开始计时； 2.4打开外接压缩空气阀门，调节并控制气源静态压力应≤0.25MPa（气源静态压力是指臭氧发生单元未工作时，压缩空气压力。可通过调节旋钮，“+”是增大，“-”是减小）； 2.5气源压力调整合格后,按下“臭氧开”绿色按钮，“臭氧开”绿色按钮指示灯亮，相应的“臭氧关”红色指示灯灭，此时臭氧发生单元开启； 2.4匀缓调节“电流调节”旋钮至MAX位置，直至电流运行至额定值内（10A）； 2.5臭氧发生单元开始工作时，调节气体流量计进气量，使进入臭氧发生单元的空气流量为120L/MIN； 2.6臭氧发生单元开始按预定的参数运行时，开始计时，准备在不同的杀菌时间内，到洁净区取样； 2.7臭氧发生单元开始运行时，每间隔30MIN取样一次，共累计取样7次(取样时间段为设备杀菌开始至30MIN、60MIN、90MIN、120MIN、150MIN、180MIN、210MIN)，以确定在不同的杀菌时间内的微生物杀菌率； 2.8人员进入洁净区取样时，应带上防护面具，直接将含有枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞菌片培养皿盖盖上，每个时间段时取1个培养皿，用牛皮纸包扎好，传出洁净区； 2.9取样全部结束后，将含有枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞菌片培养皿盖送实验室测试培养； 3、微生物培养、计数： 3.1将每个培养皿中的含菌片，放入100ML已灭菌PH=7蛋白胨缓冲液，将此含菌溶液分别稀释成1：10、1：100、1：1000，放入营养琼脂培养基中，在37℃下培养3天，计数； 3.2初期菌片的菌数计数方法与以上相同，可与在不同杀菌时间内的菌片同时计数。 三、合格标准： 1、试纸内枯草芽孢杆菌数量小于1*103个(杀菌率应为99.9%)，为合格。 2、根据不同的时间其杀菌率不同，合理的选择日常消毒和每月定期大消毒臭氧设备运行时间。 四、实验记录 测 试 前 1、测量区域：精烘包四楼洁净区 （√） 2、机组新风阀状态：应关闭 （√） 3、HVAC机组开始运行时间：10:02频率：40HZ 4、洁净区人流物流通道门：应关闭