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第十五章 干细胞技术 主 要 内 容 干细胞概述（定义、特征、分类、研究进展） 干细胞的培养 干细胞的应用 一、干细胞概述 1、概念： 干细胞是动物（包括人）胚胎及某些器官中具有自我复制和不同程度分化潜能的一些细胞。在一定条件下，能分裂、产生出表现型和基因型都和自己完全相同的子细胞，同时还能分化为各类祖细胞和特化细胞。 一、概述 干细胞是重建、修复病损或衰老组织、器官功能的理想种子细胞。 干细胞除了在细胞治疗、组织器官移植、基因治疗具重要意义外，还在新基因发现与基因功能分析、发育生物学研究、新药开发与药效以及毒性评估等领域具有重要的意义。 一、概述 干细胞研究1999年被Science评为十大科技进展之首；2000年再度入选世界十大科技进展。 美国诺贝尔奖获得者吉尔伯特预言： “用不了50年，人类将能够培育出人体的所有器官。” 一、概 述 2、干细胞的特征： 具有无限增殖分裂的能力； 长期保持自我稳定的能力； 长期保持分化成其它细胞的可能性； 产生新细胞是对组织（细胞）损伤的反应； 以对称或不对称两种方式进行生长（由细胞质中调节分化蛋白的不均匀分配决定）。 2、干细胞的特征： 对称分裂(symmet ric cell division) , 形成两个相同的子干细胞; 非对称分裂(asymmet ric ccell division) , 即干细胞分裂后的两个子细胞一个为干细胞, 而另一个为祖细胞, 祖细胞在外界刺激因子的作用下可以向多个细胞系的终末期分化。 2、干细胞的特征： 形态学特征： 细胞小，核较大，明显，有1至多个核仁； 细胞间界限清晰，形态扁平； 碱性磷酸酶（AKP）染色阳性； 细胞克隆如鸟巢状； 一、概 述 3、分类： （1）、按来源分： 胚胎干细胞（ESC）： 胚胎内细胞团（ICM） 原始生殖细胞（PGC） 成体干细胞（ASC）：骨髓、角膜、皮肤、心脏等 一、概 述 3、分类： （2）、按分化潜能分： 全能干细胞：受精卵及八胞期以前的卵裂球 多能干细胞：骨髓造血干细胞 分化12种血细胞 专能干细胞：大多数成体干细胞，如上皮组织基底层的干细胞，一般处于稳定更新状态，组织损伤时分化起修复作用。 一、概 述 4、研究进展 1981年，Evans等获得小鼠胚胎干细胞； 1990年，Piedrahita等获得猪和绵羊的胚胎干细胞； 1991年，Meineeke-Tillmann等获得山羊胚胎干细胞； 1992年，Satio等获得牛胚胎干细胞； 1992年，Sukoyan等获得水貂胚胎干细胞； 1993年，Oraves等获得兔胚胎干细胞； 一、概 述 1995年，Thomson等获得恒河猴胚胎干细胞； 1996年，Pain等获得鸡胚胎干细胞； 1997年美国华盛顿大学的多纳尔·托马斯报告说，将正常人的骨髓移植到病人体内，可以治疗造血功能障碍； 1998年，Thomson和Shamblott实验室分别用人的胚泡和早期胚胎的生殖嵴培养出胚胎干细胞（ES）和生殖嵴干细胞（Embryonic germ stem cell）； 一、概 述 在一些原本认为不可更新的组织中发现干细胞，如：亚脑室区、侧脑室区和嗅球的连接处以及海马区； 目前已发现存在干细胞的组织有：骨髓、外周血、脐血、血管、脑、脊髓、皮肤、骨骼肌、肝脏、胰腺、角膜、视网膜、牙齿和消化系统上皮等。 一、概 述 1999年12月，美国科学家在《美国科学院院刊》报告说，小鼠肌肉组织的成体干细胞可以“横向分化”为血液细胞。随后，世界各国的科学家相继证实，成体干细胞包括人类的成体干细胞具有可塑性。骨髓间充质干细胞可分化为骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞、神经元细胞等。 避开了伦理争议和异体免疫排斥问题。 一、概 述 2001年4月，美国科学家发现，从病人臀部和大腿处抽取的脂肪中，含有大量类似干细胞的细胞，这些细胞可以发育成健康的软骨和肌肉等。这一发现有可能使脂肪成为干细胞的主要来源。 2004年12月，法国科学家发现，通过培育人类干细胞可以将每个干细胞转化为200万个红血球。 该发现向着数十年来批量制造红细胞的目标又迈进了一大步，该研究将最终使得血液短缺成为历史。 一、概 述 2005年2月加拿大科学家在人体脐带中发现一种新的干细胞源。这种干细胞可以生成骨胳、软骨、肌肉和其他结缔组织。 把在结缔组织中发现的这些干细胞分离、培养几周，生成了足够多的细胞。 这项发现将对骨髓移植有促进作用。 一、概 述 2005年1月，台大医院陈耀昌等医生从新鲜胎盘分离出胎盘间质干细胞，是介于“胚胎干细胞”与“成体干细胞”间的新种干细胞； 放入培养基中诱导分