医学微生物学--细菌的遗传与变异.ppt

有荚膜的活菌？如何证实？ 三、细菌的基因转移与重组 Griffith认为，活的无荚膜肺炎链球菌（R菌）从死的有荚膜肺炎链球菌（S）中获得某种物质，而能产生荚膜，这一现象称之为转化。引起转化现象的物质称为转化因子。 三、细菌的基因转移与重组 1、转化因子是DNA还是蛋白质？2、如何证实你的推测？ 1944年， Avery研究揭示，转化因子的本质是DNA，即遗传物质是DNA。 三、细菌的基因转移与重组 悲催原因：DNA在结构上似乎不像蛋白质那样变化多端，具有个性，很难设想可作为遗传信息的载体；Avery过于谨慎，在论文中只愿意说“DNA或许是转化因子的基本单位”。 鉴于对Avery理论抱有怀疑，诺贝尔奖评委会认为推迟发奖更合适。1952年，当对Avery成就的争议平息、准备授奖时，Avery已撒手人寰。 ● 接合（conjugation） ● 转化（transformation） ● 转导（transduction） ● 转座（transposition） 基因转移的方式 三、细菌的基因转移与重组 转化：受体菌从周围环境中直接摄取供体菌游离的DNA片段，并整合入受体菌基因组中，从而获得供体菌部分遗传性状的过程。 三、细菌的基因转移与重组 荚膜基因 转化条件： ● 供体菌DNA片段的大小：10～20kb  ● 供体DNA性质：同源性高的、未变性 的双链DNA；质粒DNA。 ● 受体菌：处于“感受态” （competence）状态，可采 用CaCl2诱导法、电穿孔法。 三、细菌的基因转移与重组 三、细菌的基因转移与重组 莱德伯格（J. Lederberg）立志成为一名内科医生，进入哥伦比亚医学院学习了2年。1946年暑假，莱德伯格进入耶鲁大学微生物学家塔特姆（EL. Tatum） 实验室学习，对细菌遗传学十分入迷。假期结束后，他不再回医学院，而留下给塔特姆作实验室助理。 “圣者随时而行，贤者应事而变，智者无为而治，达者顺天而生”（老子） 原养型菌落产生原因？ 如何证实？ ①基因突变？ ②接合？③转化？ 接种至基础培养基 Met＋His＋Phe＋Trp＋，产生频率为1×10－5 Met－His－Phe＋Trp＋ Met＋His＋Phe－Trp－ 营养缺陷型细菌 一、细菌遗传的物质基础 不需细菌之间接触，排除接合； 一种比细菌更小的生物将菌株（左）遗传物质转移给菌株（右）。 Met－His－Phe＋Trp＋ Met＋His＋Phe－Trp－ Met＋His＋Phe＋Trp＋ ↓ 加入DNA酶(＋) 不受DNA酶干扰，排除转化。 加热杀死细菌(－) ● 接合（conjugation） ● 转化（transformation） ● 转导（transduction） ● 转座（transposition） 基因转移的方式 三、细菌的基因转移与重组 以噬菌体为媒介，将供体菌DNA片段转移到受体菌内，经基因重组，使受体菌获得新的遗传学性状。 三、细菌的基因转移与重组 （1）转导的概念 ● 是感染细菌、放线菌等的病毒。 ● 分为头部和尾部。头部由核心（核酸） 和衣壳（蛋白质）构成。 ● 必须寄生在活的易感宿 主菌体内，依靠尾部牢 牢吸附宿主菌。 三、细菌的基因转移与重组 （2）噬菌体（phage） （3）噬菌体感染细菌的结局 ● 烈（毒）性噬菌体（virulent phage）：噬菌体在宿主菌内复制增殖，产生大量子代噬菌体，最终裂解细菌，建立溶菌周期。 三、细菌的基因转移与重组 三、细菌的基因转移与重组 前噬菌体 溶原性细菌 ● 温和噬菌体（temperate phage）：感染宿主菌后，其核酸整合到宿主菌基因组中，与宿主菌DNA一起复制，随细菌的分裂而传至子代细菌（“和平相处”）。 三、细菌的基因转移与重组 （4）转导的机制 在子代噬菌体组装时，可能会发生错误（1次/105～107），误将大小合适的供体菌DNA片段装入噬菌体头部，成为“假噬