基于质谱技术分析方法简介.ppt

数据及供电系统 ┏━━━━┳━━━━━╋━━━━━━┓ 进样系统 离子源 质量分析器 检测接收器 ┗━━━━━╋━━━━━━┛ 真空系统 接口问题： 气相色谱工作在接近大气压的条件下，而质谱要求高度真空。接口技术中要解决的问题就是两者工作条件的联接和匹配，要把气相色谱柱流出物中载气尽可能多地除去，保留或浓缩待测物，使近似大气压的气体变成适合离子化装置的粗真空，并协调色谱仪和质谱仪的工作流量。 直接导入型： 内径在0.25至0.32mm的毛细管色谱柱的载气流量在1～2ml/min。这些柱通过一根金属毛细管直接引入质谱仪的离子源。这种接口是迄今为止最常用的一种技术。载气和待测物一起从气相色谱柱流出立即进入离子源。由于载气氦气是惰性气体不发生电离，待测物质却会形成带电粒子。待测物带电粒子在电场作用下加速向质量分析器运动，而载气由于不受电场影响被真空泵抽走。 开口分流型： * 目录 高效液相色谱-质谱联用 气相色谱-质谱联用 串联质谱及其作用 高效液相色谱-质谱联用 混合样品注入色谱仪后，经色谱柱得到分离。从色谱仪流出的被分离组分依次通过接口进入质谱仪。在质谱仪中首先于离子源处被离子化，然后离子在加速电压作用下进入质量分析器进行质量分离。分离后的离子按质量的大小，先后由收集器收集，并记录质谱图。根据质谱峰的位置和强度可对样品的成分和其结构进行分析。但是，在液相色谱仪和质谱仪联用时，传统的HPLC系统中遇到的流量和质谱仪要求的真空之间存在的难以协调性似乎太大了。再者，HPLC缺乏灵敏性、选择性和通用的检测器也是HPLC和MS联用的推动力。为了克服这一明显的不相容问题，需要解决以下困难。 高效液相色谱-质谱联用 高效液相色谱-质谱联用 色谱仪与质谱仪的压力匹配问题 质谱仪要求在高真空［1.33×（10-2-10-5）Pa 即10-5-10-7mmHg］情况下工作，而液相色谱仪柱后压力约为常压（760mmHg，即101325）。色谱流出物直接引入质谱的离子源时，可能破坏质谱仪的真空度而不能正常工作。要与一般在常压下工作的液质接口相匹配并维持足够的真空，其方法只能是增大真空泵的抽速，维持一个必要的动态高真空。所以现有商品仪器的LC-MS设计均增加了真空泵的抽速并采用了分段、多级抽真空的方法，形成真空梯度来满足接口和质谱正常工作的要求。 高效液相色谱-质谱联用 色谱仪与质谱仪的流量匹配问题 汽化问题 一般质谱仪最多只允许1-2ml/min气体进入离子源，而流量为1ml/min的液体流动相汽化后，气体的流量为150-1200ml/min。 被色谱分离后的样品必须以气态的、未发生裂解和分子重排的形式进入质谱仪离子源。这就要求色谱流出物在进入质谱仪以前汽化。HPLC的流出物为液体，必须采用不使组分发生化学变化的方法使之汽化。 为了克服这一限制所采用的方法有：（1）扩大MS真空系统的抽气容量；（2）在引入真空系统之前除去溶剂；（3）牺牲灵敏度，分流流出物；（4）使用可在较低流量下有效工作的微型LC柱。 液质联用技术就是将液相色谱和质谱仪通过一种称为“接口”的装置直接联接起来，将通过液相色谱仪分离开的各种组分逐一通过接口送入到质谱仪中进行分析。因此，接口是色谱联用技术中的关键装置，它要协调前后两种仪器的矛盾，既要不影响前一级色谱仪器对组分的分离性能，又要同时满足后一级质谱仪对样品进样的要求和仪器的工作条件。接口将两种分析仪器的分析方法结合起来，协同作用，取长补短，获得了两种仪器单独使用时所不具备的功能。 高效液相色谱-质谱联用 高效液相色谱-质谱联用 接口 一、直接液体导入接口 二、传送带式接口 三、热喷雾接口 四、粒子束接口 五、快原子轰击 六、基质辅助激光解吸离子化（MALDI） 七、大气压离子化技术 高效液相色谱-质谱联用 直接液体导入接口（DLI）是将HPLC的流动相沿着进样杆流动，然后通过一个直径为3-5μm的针孔，使液体射入质谱计的CI离子源中。仅仅大约10-50μl/min的液流，就如小液滴流一样可进入离子源，否则质谱计的泵系统将被损伤。当它通过一个加热的去溶剂区域时，溶剂蒸发。在完全进入离子源后，这些蒸气由电子轰击源电离，在所使用的离子源压力下（约1 torr,1torr=133.322Pa），CI等离子体形成。因为溶剂蒸气大大超过任何样品量，当分析物洗脱导入离子源后，用CI方式使之电离。 传送带式接口（MB）是将LC柱后流出的洗脱液，不停地由传送带