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第34 卷 第10 期 中 国 预 防 兽 医 学 报 Vol. 34 ，No.10
2012 年 10 月 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Oct. 2012
doi: 10.3969/j.issn.1008-0589.2012.10.02
支气管败血波氏杆菌外膜蛋白双向电泳图谱的建立
1,2 1 1 1 1* 1 2*
秦风彦 ，刘 燕 ，韦 强 ，肖琛闻 ，鲍国连 ，季权安 ，姚火春
(1. 浙江省农科院畜牧兽医研究所，浙江杭州 310021 ；2. 南京农业大学动物医学院，江苏南京 210095)
摘 要：为建立支气管败血波氏杆菌(Bb)外膜蛋白(OMPs)双向电泳(2-DE) 图谱，本研究利用碳酸钠法提取
OMPs ，并分别对裂解液、pH 值、上样量、聚焦条件、染色方法等进行优化。2-DE 结果表明，用裂解液5 M
Urea 、2 M Thiourea 、2 % CHAPS 、2 % SB3 ～ 10 溶解蛋白，pH4 ～7 的13 cm 线性胶条考染上样量为750 μg 、银
染上样量为75 μg ，聚焦条件为500 V ，2 h ，1 000 V，1 h，8 000 V，2∶30 h ，8 000 V，4 h 时，能获得聚焦良好、
分离清晰的Bb OMPs 图谱。本研究首次建立了Bb OMPs 的2-DE 图谱，为其蛋白质组学研究奠定了基础。
关键词：波氏杆菌；外膜蛋白；双向电泳
中图分类号：S852.61 文献标识码：A 文章编号：1008-0589(2012)10-0766-04
Establishment of 2-DE profile of outer membrane proteins of
Bordetella bronchiseptica
1,2 1 1 1 1*
QIN Feng-yan , LIU Yan , WEI Qiang , XIAO Chen-wen , BAO Guo-lian ,
1 2*
JI Quan-an , YAO Huo-chun
(1. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Sciences, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, China;
2. College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)
Abstract : To establish the two dimensional electrophoresis (2-DE) profile of outer membrane proteins (OMPs) of Bordetella
bronchiseptica, OMPs were extracted from B. bronchiseptica by sodium carbonate treatment. The
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