分化及其调控相关组织干细胞的机制研究.docVIP

项目名称： 体内间充质干细胞自我更新、分化及其调控相关组织干细胞的机制研究 李保界 上海交通大学 2012.1至2016.8 上海市科委  基于MSC广谱的疾病治疗应用前景，针对目前对MSC的微环境、自我更新、分化机理等缺乏系统研究的现状, 本课题拟解决以下关键科学问题:MSC或成骨细胞，比较MSC和成骨细胞作为造血微环境在改善HSC造血中的作用，并探讨BMPRIA和TGF(受体特异敲除对HSC造血的影响；研究MSC的减少或缺失对SSRIs （抗抑郁症药物）引起的NSC神经元分化的可能作用；研究MSC的减少或缺失对LPS引起神经损伤修复的影响。 5． MSC自我更新与定向分化的信号调控机制 研究Bmi1在MSC增殖、分化以及衰老中的作用；研究p53和p16在Bmi1引起的MSC衰老及分化中的作用以及与过氧化物的关系；研究BMP-BMPRIA-MAPK在调节MSC增殖和分化中的作用及分子机理。 6． MSC自我更新与分化的表观遗传学调控 利用基因敲除小鼠，研究表观遗传关键调控基因在MSC自我更新与分化中的作用及机制；确立在MSC自我更新与分化过程中被表观遗传修饰的靶基因谱以及与上述关键调控基因的关系；搜寻MSC自我更新与分化过程中新的lncRNA和microRNA分子，并阐释其调控成骨分化的功能；建立调控MSC自我更新与分化的表观遗传网络，并与其信号调控网络和基因表达图谱建立联系。 7． 筛选可调节体内MSC更新、定向分化以及促进组织损伤修复的活性分子 改造BMP蛋白分子以及筛选BMPs的小分子激动剂，在体研究BMPs激动剂在体内MSC自我更新、分化、骨再生/骨折愈合以及造血和神经损伤修复中的作用；探讨BMP是否通过MSC或成骨细胞促进造血。  二、预期目标 总体目标： 利用多种动物模型，通过研究正常生理状况下、衰老、骨折愈合、造血、神经损伤修复过程中MSC的活动与功能，在理论方面，阐释MSC的维持、自我更新、分化的调控机制，深入地了解MSC的生物学本质；在应用方面，探讨活性蛋白或小分子化合物通过调节MSC的增殖与分化，在促进骨再生、HSC造血和神经再生修复中的应用，为MSC广泛的临床应用提供坚实的实验依据。最终促使我国在MSC相关领域形成自己的特色，达到国际领先水平。同时，以本项目为纽带，促进多学科、多院校的合作和交流，培养一批优秀的干细胞研究人才。 BMP/TGFB信号受阻的MSC 和成骨细胞等对HSC 微环境的贡献以及对神经损伤修复的作用。改造BMP 蛋白分子以及筛选BMPs 的小分子激动剂，研究它们对体内MSC 的维持、自我更新和分化、以及HSC 造 血、骨及神经再生与修复中的作用。 5．取得具有国际影响的原创性成果,预期在国内外专业期刊上发表一批高水平论文。其中在国际一流学术刊物（IF10）上发表论文10 篇以上，在有影响力的杂志（IF5）上发表论文50 篇以上。另外，申请专利5 项以上。 6．预计培养博士后25-35 人，博士研究生50-80 人及一批学术水平高、创新能力强的中青年学术骨干,为 MSC 研究打造一支具有国际影响力的高水平研究队伍。  三、研究方案 学术思路： 间充质干细胞作为研究最活跃的成体干细胞，在骨骼的发育与再生中起重要的作用，同时还具有其它干细胞不具有的广阔的应用前景。目前，对MSC的稳态维持、自我更新与分化的调控机制知之甚少，因此无法精细地控制MSC的活动与功能，以达到预期的治疗效果，严重阻碍了MSC的临床应用。此外，人们尚不清楚骨骼以外的修复功能是否也是内源性MSC固有的。在综合本团队及国内外的最新研究进展的基础上，我们将以MSC的微环境、体内自我更新与分化的遗传和表观遗传学机制、MSC支持其它组织（造血和神经）再生与修复的机制为研究主线，以多种基因敲除小鼠为工具，对正常及病理状态下调控MSC命运的关键环节特别是关键分子靶点及信号网络进行系统的研究。 通过以上几个方面的系统研究，我们将对MSC的体内自我更新与分化有一个全面的了解，从而指导MSC的临床应用。探讨活性蛋白PTH改变骨髓微环境中的MSC成骨分化促进造血的机制和应用，通过对重组BMP以及BMP小分子激动剂的筛选，寻找可通过调节MSC自我更新与定向分化，对抗骨质疏松、促进骨折愈合以及其它组织修复的小分子药物，提升中国药物研发的能力，创造具有自主知识产权的、具有国际竞争力的新技术、新产品，服务于我国经济发展与人民健康。 课题一：成体MSC的骨髓微环境 研究目标: 明确脂肪细胞、成骨细胞、HSC及血管内皮细胞是否作为骨髓MSC的微环境调节MSC的干性维持、自我更新与分化。 鉴定骨髓MSC微环境的旁分泌活性分子在调节MSC的干性维持、自我更新与分化中的作用。 明确BMPs是否作为MSC微环境中的重要活性